组织芯片制作流程及注意事项：

一、组织芯片制作的一般过程

1、选取待研究的组织。现在人们利用组织芯片技术对人体各组织均有研究，包括肝脏，前列腺，心脏等等，据相关数据显示，在大脑组织中的应用Z多。医学上常选取一些病变器官进行研究。根据制作方法来分，微阵列主要有石蜡包埋的组织微阵列和冰冻微阵列两种。

2、经检测后标记出待研究的区域。组织微阵列的检测仪主要是高性能显微镜、荧光显微镜或共聚焦荧光显微镜。适用的检测技术有苏木精—HE染色，免疫组织化学(IHC)染色，原位杂交(ISH)，荧光原位杂交(FISH），原位PCR，寡核苷酸启动的原位DNA合成(PRINS)等。

3、使用组织芯片点样仪将标记好的组织按设计排列在空白蜡块上。首先要利用打孔机在已经标记好的靶位点上进行打孔，将组织芯转入蜡块孔中，重复操作可转入上千个样品组织芯。

4、使用切片机对阵列蜡块进行连续切片即获得组织芯片。根据制作方法来分，微阵列主要有石蜡包埋的组织微阵列和冰冻微阵列两种。后者可以克服上述前者的多种缺陷(含醛基的化合物(可能损伤RNA或使目标抗原结构断裂或破坏抗原——抗体结合位点，另外，石蜡包埋乙醇固定过的组织也无法避免RNA降解）。

组织芯片制备技术的关键点和问题

1、载玻片的清洁和防止掉片处理亦是制作切片的关键不能忽视。

2、从供体蜡块中采集组织芯时，由于外检蜡块采用普通石蜡，其韧性差、质地硬容易碎裂和使打孔针弯曲，所以要细心、耐心地采集组织芯，并可以将外检蜡块在37℃预热后再采集。

3、构建好的TMA芯片中，要使组织芯和受体蜡块融合成一体，需要在55℃温箱加温。此时温度、时间调控十分重要，既要使组织芯不易掉片、滑片，又要防止受体蜡块融化移动组织芯位置。

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