本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测本产品，转化效率可达108。本产品为dam-，dcm-的菌株，能够排除dam，dcm 甲基化的影响。

菌株基因型为：sup E hsd Δ5 thi Δ(lad-pro AB) F+[tra D36 pro AB+lacIQlacZΔM15]

干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

使用方法：

1. 取感受态细胞置于冰浴中。转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据

实际情况分装使用。

以下实验以50 μL 感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量

的DNA，通常100 μL 感受态细胞能够被1 ng 超螺旋质粒DNA 所饱和），用移液器

轻轻吹打混匀，冰浴30 分钟。

3. 42℃热击45 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3 分钟。

4. 每个离心管中加入450 μL 无菌的SOC 或LB 培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150 rpm 振荡培养45 分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC 或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16 小时。

注意：

1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300 μL 转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心（4,000 rpm，2 分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。