组织线粒体提取试剂盒说明书
发布时间:2017/5/10 9:19:00储存条件:
2-8℃保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管
底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清
洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、
糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。
对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的,本试剂盒用简便快速的方法即
可在40 分钟内提取得到线粒体。
本试剂盒可用于各种动物实体软、硬组织样本的线粒体提取。不能用于冷冻样品的线粒
体提取。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体
洒落。
? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低
温。
? 使用Dounce 匀浆器匀浆,如果没有Dounce 匀浆器,用普通1ml 玻璃匀浆器匀浆也可。
1. 取50-100mg 新鲜动物组织样本,用PBS 洗涤干净。
2. 用剪刀尽可能剪碎,用冷PBS 洗涤两次。
3. 加入400μl 冷的试剂 A,置冰上10 分钟。
4. 用Dounce 匀浆器匀浆30-40 下,然后在4℃,500×g 条件下离心5 分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6. 在4℃,11000×g 以上条件下离心20 分钟。
7. 在沉淀中加入400μl 冷的试剂B,混匀。
8. 在4℃,11000×g 以上条件下离心20 分钟。
9. 弃上清,沉淀用线粒体保存液重悬。
10. 即得到线粒体样品,置冰箱备用或直接用于下游实验。