注：

● 真菌蛋白提取液： 含多种有效成分，可以充分释放蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

● 蛋白酶抑制剂混合物：包含6种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin

A、Bestatin、E-64。

注意：

1、 蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。

储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；蛋白提取液室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清

洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

????真菌蛋白提取试剂盒（二维电泳用）适用于从各种真菌中提取总蛋白。优化的裂解液配方可以充分释放各种真菌样本蛋白，提取过程简单方便，可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、基因检测、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系本公司，选择其他货号产品。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1. 提取液制备：每500ul 真菌蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后备用。

2. 取培养真菌样本，在4℃，3000g 条件下离心5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集菌体。

3. 用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 将菌体置于研钵中用液氮研磨5 分钟左右至粉末。若无液氮研磨条件，可直接用蛋白提取液研磨。

5. 每100mg 菌体中加入500ul 蛋白提取液，混匀后，振荡30-45 分钟。

6. 在14000g 条件下离心15 分钟。

7. 将上清吸入另一干净离心管，即可得到真菌总蛋白。

8. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。

注：

① 菌体数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。

② 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。