植物线粒体提取试剂盒说明书
发布时间:2017/5/10 21:01:00储存条件:
2-8℃保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。
对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的,本试剂盒用简便快速的方法即可在40 分钟内提取得到线粒体。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
1. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 1g 植物组织样本剪碎,采用以下一种方法处理:
i. 加入 3ml 提取液后用匀浆机/匀浆器匀浆。
ii. 置于研钵中用液氮研磨,研磨后加入 3ml 冷的提取液。
iii. 加入 3ml 提取液直接置冰上研磨。
2. 将匀浆用 250 目细胞筛或3 层纱布或脱脂棉过滤。或者在4℃,100×g 力条件下离心1 分钟,收集上清,弃沉淀。。
3. 将滤液 700g 离心10 分钟。取上清。
4. 将上清 11000g 离心20 分钟。
5. 弃上清,沉淀中加入 1.5ml 线粒体保存液重悬。
6. 11000g 离心15 分钟。
7. 弃上清,沉淀即为线粒体。
8. 用线粒体保存液悬浮线粒体,置冰箱备用或直接用于下游实验。