AEC底物显色试剂盒使用说明书

发布时间:2016/7/4 11:48:00

规格:1ml、10ml
内容成分:
溶液 A浓缩液(20×) 1ml/10ml 溶液 B浓缩液(20×) 1ml/10ml 溶液 C浓缩液(20×) 1ml/10ml 保存条件:
2-8℃避光保存,复检期至少1年。
产品简介:
3-氨基-9-乙基咔唑 (3-amino-9-ethylcarbazole,AEC) 是过氧化物酶 (Peroxidase) 的生色底物,在过氧化物酶的催化下,过氧化氢氧化AEC形成稳定的红色沉淀产物。该红色产物不溶于水,但溶于有机溶剂。该AEC底物显色试剂盒加入了增强显色试剂,敏感度大大提高。产品操作便捷,显色清晰,重复性好,适用于HRP系统的 IHC 和 Western Blot实验的酶促显色。
使用说明:
1.工作液配制:
取850ul无菌双蒸水,依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均匀,即配成AEC工作液。如需要更大体积工作液,可按相应比例放大。此溶液必须现用现配,配好后避光保存,半小时内使用,过期后请将剩余的液体废弃。
2.显色:
1)蛋白质印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜浸入AEC工作液中),显色时间一般为10-30min。显色完毕后,将膜浸入蒸馏水中,终止反应。
2)组织切片染色:向组织切片上加入适量AEC工作液,确保能充分覆盖样品。室温孵育10-30 min,避免光照,直至显色至预期深浅。可在显微镜下观察控制显色时间。显色后用蒸馏水洗涤即可终止显色反应。
3)对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
注意事项:
1. 由于AEC生成的颜色产物为脂溶性,因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,须用水性封片剂封片。
2. 根据情况自行优化实验条件,调整显色时间,获得显色效果。
3. AEC有一定毒性,操作时请采取必要的防护措施。