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DNA退火缓冲液(5×)说明书
发布时间:2016/7/4 11:49:00产品说明:
DNA退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos),即DNA寡核苷酸退火缓冲液,该退火缓冲液不仅可以用于
常规的DNA Oligo的退火,而且特别适合于较难退火的用于siRNA质粒构建的DNA Oligo的退火。使用DNA退火
缓冲液( 5×)可以有效避免DNA Oligo自身形成发夹结构,并且两条Oligo退火后可以直接和经酶切纯化的质粒连
接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
使用本试剂操作非常简单,只需把待退火的DNA Oligo和DNA退火缓冲液( 5×)按照一定比例混合后,置于
PCR仪上,约60分钟即可完成。
操作步骤:
1. 用去离子水将DNA 退火缓冲液( 5×)稀释成1×工作浓度。
2. 用DNA 退火缓冲液( 1×)分别溶解互补的两条DNA 寡核苷酸单链,使它们的摩尔浓度相等;
3. 取相同体积的步骤2 中得到的寡核苷酸单链溶液混合,置于PCR 反应管中,样品不要用矿物油覆盖。
4. 将PCR反应管置于PCR仪中,设置反应条件: 95℃变性2min;缓慢降温至25℃,降温过程用时至少45min;产
物可4℃短暂保存,用于后续实验。长期保存可于-20℃冻存。
注意事项:
1. DNA 退火缓冲液(5X)只适合于DNA oligo 的退火,不能用于RNA oligo 的退火。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴性手套操作。