原理
实心核颗粒色谱柱采用高压气动增压原理,选用G系列增压泵,以压缩空气作为气源,其采用单气控非平衡气体分配阀来实现泵的自动往复运动。接液部分采用不锈钢,泵的全套密封件均为进口优质产品,从而保证了泵的性能。适用于有机溶剂体系半微量的高性能的SEC分析柱。由粒径均一,但每个填料上分布大小不同的孔,即由细孔多分散型均一粒径的填料装填而成,从而实现了校正曲线的优异的线形相关关系。
柱长及内径选择
1、长度的选择
柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
2、内径
柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱蜂畸变,柱分辨率降低,重现性不好。
因此对于复杂样品需要准确分离,须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
特点
实心核颗粒色谱柱所具备的特点:
1、高效分离
样品通过短通道进行分离。这样可以有效地减少系统体积,提高传递速率和色谱分离的效率,使得供样速度更快。
2、准确可靠
对样品的吸附取决于表层固定相的化学性质,而离子强度、pH值等操作因素的影响几乎可忽略,从而更加准确和可靠。
3、稳定性强
由于实心核是硅胶或者聚合物制成,不会因为壁面吸附的变化而出现质量漂移,从而保证了色谱分离结果的稳定性。
4、内部洁净
实心核内部没有孔道,因此不容易产生堵塞和污染。在使用过程中,实心核可以随时取出进行清洗和再生,从而延长使用寿命。
组成部分
实心核颗粒色谱柱由两部分组成:实心核和表层固定相。
1.实心核是由纯净的硅胶或者聚合物制成的,在保证压力和温度稳定的情况下可以重复使用。
2.表层固定相负责分离,可以根据需要设定不同的化学性质和孔径大小。
定期维护
1、定期清洗柱端和连接件非常重要,可以避免柱端堵塞和泄漏问题。清洗步骤包括:
-使用无机溶剂(如乙腈或甲醇)冲洗柱端,去除表面积聚的杂质和样品残留物。
-检查连接件和密封圈的状态,确保无损伤或老化,必要时更换。
2、在样品进入本产品之前,进行适当的预处理可以减少污染和损伤:
-使用过滤器或固相萃取技术去除样品中的颗粒物和大分子有机物。
-避免使用含有大量盐类或离子的溶剂,以防止盐析现象和堵塞。
3、定期使用适当的洗涤剂可以帮助去除柱内的积聚物,保持性能稳定:
-对于亲水性化合物的柱,使用含有醋酸或乙酸的缓冲液进行反向洗脱。
-对于疏水性化合物的柱,使用含有甲醇或乙腈的缓冲液进行洗脱。
4、定期检查和更换流动相是保持正常运行的关键步骤:
-确保流动相的纯度达到色谱分析要求,避免杂质对柱的污染。
-检查流动相的pH值,确保在柱性能的稳定范围内。
5、避免在恶劣条件下使用该产品,例如超出其推荐的温度或压力范围,以防止柱填料的热解或变性:
-根据厂家提供的技术规格表,选择合适的工作温度和压力范围。
-避免突然的温度变化和压力波动,以保护其结构和性能。
6、定期进行校准和质检是确保分析结果准确性和重复性的关键措施:
-使用标准物质进行校准,验证分析结果的精确性。
-进行柱效测定,评估分离性能和分辨率。
7、当不使用时,应该进行合理的存储和保护:
-在干燥、避光、无尘的环境中存放色谱柱。
-使用柱保护器或封闭柱端,防止灰尘和空气中的污染物进入柱内。