乳品塑化剂快速检测试剂盒（货号：Ounuo95002）

一、原理

乳品塑化剂快速检测试剂盒本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法，在微孔条 上预包被邻苯二甲酸二正丁酯抗原，样本中的残留 物邻苯二甲酸二正丁酯将和酶标板包被的抗原竞争 邻苯二甲酸二正丁酯抗体，用 TMB 底物显色，样 本吸光值与其所含残留物邻苯二甲酸二正丁酯的含 量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物 邻苯二甲酸二正丁酯的含量。

二、试剂盒特性

1. 试剂盒灵敏度： 30ppb

2. 孵育温度： 25℃ 

3. 孵育时间： 15min～15min

4. 样本检测下限

液态奶················································ 30ppb

牛、羊乳粉···········································210ppb

5. 交叉反应率 邻苯二甲酸二正丁酯

6. 样本回收率

液态奶·········································· 90% ±30%

牛、羊乳粉······································ 90% ±30%

三、所用仪器、试剂

具备的仪器：酶标仪、均质器、振荡器、天平（感 量 0.01g）。

微量移液器：单道 20μl～200μl、单道 100μl～ 1000μl、多道 30～300 μl。

试 剂：纯化水。

四、样本前处理步骤（乳品塑化剂快速检测试剂盒）

（a）液态奶 1、 取 100ul 均质后的样本，加入 400ul 样本稀释 液，充分震荡； 2、 取下层液体用于分析。 样本稀释倍数: 1 倍 （b）牛、羊乳粉 1、 取 1g 均质后的样本，加入 6ml 纯化水，充分 震荡； 2、 取 100ul 稀释后的样本，加入 400ul 样本稀释 液，充分震荡；

五、操作步骤（乳品塑化剂快速检测试剂盒）：

 1、 从 2～8℃冷藏环境中取出所需试剂，室温（20～ 25℃）平衡 30min 以上，注意每种液体试剂使 用前均需摇匀。 

2、 取出框架及需要数量的微孔，将不用的微孔放 入自封袋，保存于 2-8℃。 

3、 编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每 个样本和标准品做 2 孔平行，并记录标准孔和 样本孔所在的位置。 

4、 加标准品/样本 50μl/孔到各自的微孔中，然后加 入酶标记物 50μl/孔，再加入抗体工作液 50μl/ 孔，用盖板膜封板，轻轻振荡混匀。25℃环境 中反应 15min。 

5、 将孔内液体甩干，用已稀释的洗涤液 250μl/孔 洗板 4～5 次，每次间隔 15～30 秒，用吸水纸 拍干（拍干后未清除的气泡可用干净的枪头刺 破）。 

6、 显色：加入底物 A 液 50μl/孔，再加入底物 B 液 50μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜封板，25℃ 环境中避光显色 15min。 7、 测定：加入终止液 50μl/孔，轻轻振荡混匀，设 定酶标仪于 450nm 处（建议用双波长 450/630n m 检测，5min 内读数），测定每孔 OD 值。