黄曲霉毒素B1 ELISA快速检测试剂盒

Aflatoxin B1 Test kit

（货号：Ounuo98001）

一、原理

黄曲霉毒素B1 ELISA快速检测试剂盒, 本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中的残留物黄曲霉毒素B1将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争黄曲霉毒素B1抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素B1的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物黄曲霉毒素B1的含量。

二、试剂盒特性

1） 试剂盒灵敏度：   0.02ppb

2）孵育温度：       25℃

3）孵育时间：       30min～15min

4)  样本检测下限

饲料 大米、玉米、花生、组织、食用油··········· 2 ppb

5) 交叉反应率(黄曲霉毒素B1 ELISA)

黄曲霉毒素B1 ···· 99.9%

黄曲霉毒素M1 ··· 6.6%

黄曲霉毒素B2 ··· 83%

黄曲霉毒素G1 ··· 107%

黄曲霉毒素G2 ··· 42%

6) 样本回收

饲料 大米、玉米、花生、组织、食用油 ··· 95±35%

三、样本前处理步骤

1） 样本处理前须知

（a）实验中必须使用一次性吸头，吸取不同试剂时要更换吸头。

（b）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。

2）样本前处理需配制：

配液1  样本复溶液：

用去离子水将20×浓缩复溶液按1：19稀

释（1份20×浓缩复溶液+19份去离子水）。

配液2  样本提取液：

将甲醇与去离子水按7:3比例混合均匀（7份甲醇+3份去离子水）。

四、操作步骤(黄曲霉毒素B1 ELISA)

1、  从2～8℃冷藏环境中取出所需试剂，室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、  取出框架及需要数量的微孔，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。

3、  配液：将40ml浓缩洗涤液（20倍浓缩）用去离子水按照1：19稀释（1份浓缩洗涤液+19份去离子水），或按所需用量配制洗涤液。

4、  编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、  加标准品/样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗体工作液，用盖板膜盖板，轻轻振荡混匀，25℃环境反应30min。

6、  将孔内液体甩干，用稀释后的洗涤液250μl/孔洗板4～5次，每次间隔15～30秒，用吸水纸拍干（拍干后未清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

7、  显色：加入底物A液50μl/孔，再加入底物B液50μl/孔，轻轻振荡混匀，25℃环境中避光显色15min。

8、  测定：加入终止液50μl/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，5min内读数），测定每孔OD值。