高效液相色谱法检测药品中的EGTA的含量
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 EGTA是乙二醇二乙醚二胺四乙酸的简称,和EDTA属于螯合剂,EGTA镁配合物是很不稳定的EGTA钙配合物相对较稳定。所以,医学上常EGTA构建无钙环境。

由于EGTA 钙离子螯合可以抑制一些酶(如核酸酶)的活性,在蛋白质类药品生产中可以添加EGTA抑制蛋白酶对药品的降解,还能够防止金属离子对药物自身氧化的催化,有利于提髙药物在制备、存储和临床配制过程中的稳定性。但是,过量的EGTA进入到体内,螯合血液中的Ca2+造成血液中钙的流失,同时会螯合中枢神经细胞外Ca2+,降低下丘脑细胞Ca2+,造成体温升高因此,在药品生产中EGTA 的含量必须严格把控,建立完整的EGTA含量检测方法

高效液相色谱具有高压、高速、高效和高灵敏度等优点,在食品安全检测及药品残留中应用较广。目前,实验室通常采取滴定法来测定EGTA,其准确度和灵敏度难以达到微量检测的级别。本方法利用EGTAEDTA的共性,对检测EDTA的方法进行优化改进,新方法操作简便,具有分离度好、灵敏度高、重复性好、回收率高等优点,其定量限、检出限、重复性及回收率等指标也符合国家药典要求,能够满足药品中EGTA 含量的检测

    实验仪器

实验中采用LC-600A智能全控液相色谱(南京科捷分析仪器有限公司)P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,具备多元高压洗脱、波长扫描等功能。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。

    样品前处理:EGTA 对照品溶液 精密量取EGTA 标准储备液1 mL,置于10 mL容量瓶中,加入0.01 mol/L硫酸铜溶液1 mL,用0.06 mol/L磷酸氢二钠溶液稀释至刻度,摇匀,过滤,取续滤液。

  样品溶液 精密称取样品100.00 mg,置于10mL容量瓶中,加入0.01 mol/L硫酸铜溶液1 mL,用0.06 mol/L磷酸氢二钠溶液稀释至刻度,摇匀,过滤,取续滤液。

EGTA 对照品与样品混合液 精密称取样品100.00 mg,置于10 mL容量瓶中,加入EGTA 标准储备液1 mL0.01 mol/L 硫酸铜溶液1 mL,用0.06 mol/L磷酸氢二钠溶液稀释至刻度,摇匀,过滤,取续滤液。

色谱条件:

 

色谱柱

ULtimate-AQ C184.6mm×250mm5μm

流动相

乙腈-四丁基氢氧化铵水溶液(质量分数约0.3% 四丁基氢氧化铵水溶液,醋酸调PH6.50-醋酸钠溶液(35 mmol/L 醋酸钠,醋酸调PH6.50)(20:20:60V/V/V

流速

1.5mL/min

检测波长

245nm

柱温

40

进样量

100μL

 

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品牌/商标

科捷

企业类型

制造商

新旧程度

全新

产品型号

LC-600A

原产地

南京