荧光分光光度计
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     荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。

 荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。

 

  荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧

 

  光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计,配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。

    基本原理  由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。

 

  物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光.

 

  不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

 

  在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

 基本结构

  1. 光源:

 

  为高压汞蒸气灯或疝气灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm 范围内强度几乎相等,故较常用。

 

  2.激发单色器:

 

  置于光源和样品室之间的为激发单色器或单色器,筛选出特定的激发光谱。

 

  3.发射单色器:

 

  置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。

 

  4. 样品室:

 

  通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。

 

  5. 检测器:

 

  一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。

技术参数:
波长选择范围:365nm(干涉滤光片)
EM波长范围:200-800nm
波长准确度: EM±2nm
波长重现性: EM±1nm
信噪比:蒸馏水喇曼峰S/N≥比50
响应时间2S
测定方法:a、波长扫描b、时间扫描c、定量分析
光谱处理功能:1—4阶导数光谱;计算峰面积;波峰检索;图谱运算;图谱窗口处理;图谱保存及调出;图谱打印输出
样品定量分析:时间扫描;绘制标准曲线(1-3次);浓度直读;自动测定S/N比及稳定性;进动背景扣除;定量分析打印输出


主要特点:
发射单色仪采用1200/mm凹面光栅、大孔径非球面反射镜、灵敏度特别高。
采用150W大功率汞灯,激发能量强
采用光源监控技术、测量结果稳定
高性能的光电倍增管,可获得信号噪声比
具有自诊功能,工作可靠
EM带宽小于10nm
配置Windows95计算机工作站,仪器故障率小,可靠性强
工作站采用中文对话视窗,操作方便
利用鼠标可舒适地进行扫描测定、定量分析、运算、制表和记录等系列操作
可方便地选择联机或脱机工作方式
选配件:
光源:150W氙灯
干涉滤光片(汞灯光源):254nm、313nm、405nm、436nm、546nm
干涉滤光片(氙灯光源):250nm-700nm间任选

 

功能特点

  1. 荧光发射光谱

 

  选择某一固定波长的光激发样品,记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数关系,即得荧光发射光谱。

 

  2. 荧光激发光谱

 

  选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数,即得荧光激发光谱。

 

  3.时间分辨技术;

 

  可用于对混合物中光谱重叠但有寿命差异的组分进行分辨并分别测量。

 

  时间分辨荧光测定公式如下:

 

  P(t) = P0 EXP (-t /τ)

 

  式中P(t):拟合指数函数

 

  P0:强度取值

 

  EXP:指数运算符

 

  t:时间取值

 

  τ:荧光平均时间寿命

 

产品应用

  对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析,可应用于生物化学、生物医学、环境化工等部门。

 

主流荧光产品推荐

  上海棱光生产的F96系列、F97系列荧光分光光度计;

 

  天津港东生产的F-380型、F-320型、F-280型荧光分光光度计;

 

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