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一、仪器开/关机程序
1、开机程序
1.1 打开电脑,进入桌面。
1.2 打开icycler PCR仪器的电源开关(注:该仪器有两个电源开关,一个控制PCR仪,一个控制光源系统)。
1.3 双击桌面上的软件图标,点击“yes”,进入软件的主菜单。
2、关机程序
2.1 保存数据,退出软件的主菜单。
2.2 关掉电脑,关闭icycler PCR仪器的电源开关。
二、程序文件的设置及打开
1、 实验程序已预先设定
1.1 点击软件左方主目录中的“Library”,进入该界面后。
1.2 选择“View Protocol”页面,根据路径,找到预存的程序文件。
2、 创建新的程序文件
2.1 点击软件左方主目录中的“Workshop”,进入该界面。
2.2 选择“Edit Protocol”页面,输入相应的温度、时间、重复的循环数(Repeats),增加或删除步骤(Cycle和Step),在“Select data collection step(s)”中选择需要进行荧光收集的步骤。
2.3 完成后,在“Protocol Filename”中输入程序的文件名,点击“Save this protocol”。
三、仪器操作程序
1、编辑样本
1.1 将装有反应液的PCR反应管放入PCR仪,记录样本摆放顺序。
1.2 点击进入软件左方主目录的“Workshop”界面,选择“Edit Plate Setup”页面。
1.3点击“Samples:Whole Plate loading”,根据样本摆放的顺序和样本属性,选择相应的图标(Unknown和Standard),在plate上相应位置作标识,是标准品(Standard)的,在屏幕右下方的“Standard Quantity”中输入相应浓度。
1.4点击“Select and load fluorophores”,在“1. or deselect a fluorophore”中选择荧光标记,在“2.Assign a color”中选择该标记相对应的颜色,然后在plate上对 1.3所选择的孔位进行荧光标记。
1.5 完成后,在“Plate Setup Filename:”中输入样本文件的文件名,点击“Save this plate setup”。