小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒
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小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.         标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 60ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 30ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 15ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 7.5ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   4.         配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.         温育:操作同3。8.         洗涤:操作同5。9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:  计算  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月 

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