跨膜蛋白开发常见问题解答(FAQs)
发布时间:2023/8/30 16:19:00跨膜蛋白具有多种生理功能,包括蛋白连接、识别、转运、锚定和转导等,其功能的异常与诸多疾病相关。膜蛋白是重要的药物靶点,据统计,约50%药物的靶向分子为膜蛋白。然而,由于表达量低、体外不溶、纯化不稳定、难保持天然构象等问题的存在,限制了跨膜蛋白在药物开发方面的应用。
义翘神州聚焦于多次跨膜蛋白产品的开发,成功搭建了三大技术平台,为药物早期研发提供重要的原材料。目前产品包括四次跨膜蛋白Claudin-6、Claudin-9、Claudin-18.1、Claudin-18.2,七次跨膜蛋白GPRC5D、CXCR4、SSTR2。
跨膜蛋白开发常见问题解答:
①如何选择膜蛋白开发平台?
不同膜蛋白平台具有不同的优势和劣势,应根据下游应用、成本、周期等因素进行考量。
VLP平台:
ELISA包被:可直接包
活性:较好
稳定性:较稳定
纯度:混合物
SPR/BLI:可检测
需考虑因素:浓度为总蛋白浓度;制备周期相对较短。
Detergent平台:
ELISA包被:不可直接包
活性:最好
稳定性:不稳定
纯度:较纯(只有目标蛋白)
SPR/BLI:可检测,溶液需调整
需考虑因素:制备周期相对较长,成本较高。
SMA-Nanodisc平台:
ELISA包被:可直接包
活性:较好
稳定性:较稳定
纯度:较纯(只有目标蛋白)
SPR/BLI:适合检测
需考虑因素:制备周期相对较长,成本较高。
②HPLC分析是否可以表征VLP形式膜蛋白的纯度?
HPLC方法可用于检测产品溶液中VLP颗粒的大小和均一程度,而VLP平台产生的蛋白除目标蛋白外还包括其他内源性的蛋白,故无法表征目标蛋白的纯度;由于VLP产品为混合物,目前对VLP产品的检测主要以活性检测为主,纯度仅作为一项参考指标。
③我想购买膜蛋白产品做免疫和抗体筛选,应该怎么挑选?
目前,我们的3个平台的产品各有特点,客户可以按照实际情况进行选择。VLP平台产品是一个混合物,与细胞免疫相比靶标蛋白的丰度有所提高,在没有其他平台的产品时可以用于免疫和抗体筛选。由于Detergent平台的产品存在去垢剂,因此,需要考虑去垢剂对于免疫动物的毒害和免疫过程中蛋白变性的风险。比较而言,SMA-Nanodisc平台的产品既拥有较高的靶蛋白丰度,又能维持好的天然构象,特别推荐用于动物免疫和抗体筛选实验。
更多详情可关注膜蛋白开发平台:https://cn.sinobiological.com/services/platform/multi-pass-transmembrane-protein