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重组蛋白表达四大系统优缺点及推荐表达介绍
发布时间:2023/8/29 15:55:00重组蛋白是利用DNA(RNA)重组技术表达的蛋白重组。蛋白表达是将目的基因通过电转化或者热激等手段转入合适的宿主中,利用宿主的特定生理、生化和遗传特点进行目标蛋白大量表达及纯化的生物技术。目前,较为主流的表达宿主有大肠杆菌(E.coli)、毕赤酵母(P.pastoris)、昆虫-杆状病毒(Bac-to-Bac系统)以及哺乳动物细胞系(CHO、HEK293)等。鉴于目标蛋白的应用场景和自身理化性质的差异,选择合适的表达宿主尤为关键。
大肠杆菌(E.coli):
表达系统:原核
优势:经济、快速、高产量、应用广泛
劣势:包涵体;无翻译后修饰;大分子蛋白表达困难
推荐表达:细菌类蛋白;抗原类蛋白;细胞因子;酶类
酵母细胞:
表达系统:真核
优势:经济、快速、高产量;部分翻译修饰
劣势:非人源糖基化;高甘露糖修饰
推荐表达:细胞因子;少分子量蛋白;酶类
杆状病毒-昆虫细胞:
表达系统:真核
优势:基因容量大;可溶蛋白;适合毒性蛋白;类似哺乳动物系统;翻译后修饰
劣势:周期长;成本高;缺少部分糖基化
推荐表达:细胞质蛋白;毒性蛋白;跨膜蛋白;分泌蛋白;激酶;
哺乳动物细胞表达:
表达系统:真核
优势:可溶蛋白;更低内毒素;更好的活性;更好的翻译后修饰;可瞬时转染与稳定转染表达
劣势:周期长;成本高;
推荐表达:分泌蛋白;跨膜蛋白;重组抗体;抗体等
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