噬菌体展示技术的优缺点及应用
发布时间:2023/8/2 16:05:00噬菌体展示技术是一种筛选技术,通过基因工程技术将外源蛋白或多肽的基因序列插入到噬菌体,进行多轮筛选,最终在体外获得具有高特异性和高亲和力的重组抗体。
1985年,Smith首先发现外源DNA片段可以融合到非裂解丝状噬菌体pIII外壳蛋白的编码基因上,并以融合蛋白的形式表达在病毒表面,而不影响噬菌体的传染性。随后,Winter颠覆了噬菌体展示的过程,他使用噬菌体展示抗体(而不是蛋白质),然后找出与分子甚至细胞结合的目标抗体。噬菌体展示技术这一发明,为单克隆抗体药物的发现带来了巨大的改变。
因为需求不同,所以我们所得到的噬菌体展示系统也是各不相同的,比如单链丝状展示系统、λ噬菌体展示系统等,其中又可以进行更加细致的分组,这些详细分组及使用我们会在后期和大家详细描述,这里就不一一介绍了。
噬菌体展示技术优缺点分析:
优点:
和杂交瘤技术相比,噬菌体展示技术不仅更加适合大规模抗体的生产能力,更是可以通过技术来改变诸如亲和力、免疫原性等抗体品质方面的问题。最主要的是噬菌体展示技术的筛选周期短、操作简单、应用范围广,可以用来进行抗体人源化操作等;
缺点:
噬菌体展示过程中,需要经过细菌转化、噬菌体包装等过程,极大程度上限制了库的容量和多样性。而且不是所有的序列都能够表达成功,需要提供一些外部助力,有一定的失败几率,特别是针对那些有毒性分子,很难得到表达。最主要的是噬菌体库一旦构建成功,就很难再进行体外突变和重组了,限制相对来说较高;
但总的来说瑕不掩瑜,因为无论是在抗体人源化还是大规模蛋白生产方面,噬菌体展示技术都有着无法比拟的优势。同时,其能够根据我们的需求来进行蛋白的设计,在更大程度上满足我们的需求。
噬菌体展示的应用
噬菌体展示技术在基础研究、诊断和治疗应用领域发挥了关键作用。
重组抗体具有高特异性和高亲和力,可用于在侧流分析(LFA)、ELISA和细胞成像等多种诊断平台中快速准确地识别样本中的目标抗原。大多这些平台都利用抗原捕获测定或抗体捕获测定来诊断某些疾病的存在。
阿达木单抗(市场名为Humira?)是首款通过噬菌体展示技术获得上市批准的治疗性抗体,其可中和肿瘤坏死因子,主要用于治疗类风湿性关节炎。噬菌体展示技术的出现,使得抗体药物的研发有了突破性进展,已成为最重要的药物筛选平台之一。
目前义翘神州提供噬菌体抗体库技术平台,这个平台是利用基因工程技术将抗体的基因连接到噬菌体中,并以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面,通过与靶蛋白的结合,完成噬菌体展示抗体的筛选。基于噬菌体展示抗体库构建和筛选的专业知识,义翘神州能为客户提供个性化的抗体定制服务,包括鼠源单克隆抗体、兔源单克隆抗体、鸡源单克隆抗体和全人源抗体等多个种属的抗体发现服务。更多详情可以关注:https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display
噬菌体展示技术:https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody