什么是fab抗体片段?scFv与Fab抗体的区别
发布时间:2023/8/21 17:27:00Fab片段,又叫做抗原结合片段,是指抗体的抗原结合区域,包含一条完整的轻链和一条重链的可变区和恒定区的CH1结构域。Fab片段可进一步分为两部分:由轻链可变区和重链可变区组成的Fv片段、由轻链恒定区CL和重链恒定区CH1组成的Fb片段。Fab片段含有440~450个氨基酸,其分子量约为55kDa。
与完整的IgG相比,Fab抗体片段缺乏糖基化的Fc恒定区,具有组织渗透强、半衰期短、免疫原性较低和生产成本低等优势,在诊断、临床治疗等领域展现出广阔的应用前景。目前,至少有3款治疗性Fab抗体药物获得美国FDA的批准并上市,另外,还有众多Fab抗体处于临床开发和临床前研究阶段。
作为一家专注于抗体开发领域的公司,义翘神州可提供从免疫原合成、动物免疫、Fab抗体库构建与筛选、鉴定等的一站式抗体服务。另外,我们也提供高效的Fab抗体表达纯化服务,以HEK293或CHO细胞为表达宿主,最终交付高质量的重组Fab抗体片段。更多详情,请咨询我们的技术团队。
scFv与Fab抗体的区别
scFv和Fab片段之间的差别是什么?scFv片段由抗体的重链和轻链可变区通过一条短肽(15-20个氨基酸)连接而成。Fab片段由完整的轻链以及部分重链结构(可变区和第一个恒定区)组成。Fab抗体具有CH1和CL区域,两者通过一个二硫键连接,不需要短肽。而scFv片段缺乏该区域,需要通过短肽将重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)连接在一起。
Fab
构成:VH、CH1、VL、CL
分子量(kDa):55
肿瘤渗透性:良好
稳定性:长期储存时稳定性高
scFv
构成:VH、VL
分子量(kDa):28
肿瘤渗透性:较强
稳定性:存储时间较长时不稳定
Fab抗体片段制备
Fab抗体片段可通过构建噬菌体展示抗体文库筛选获得。Fab抗体库具有多项优势。首先,它可以快速有效地筛选出难以用杂交瘤技术获得的理想抗体。其次,和scFv抗体一样,它可以轻松制备出高亲和力的Fab抗体。
利用自主开发的HEK293细胞瞬时转染技术,义翘神州成功完成多个Fab片段抗体的表达和制备项目。并且这些高质量的Fab片段,可用于抗原-Fab共结晶等应用。与酶解法制备抗体片段相比,利用哺乳动物细胞瞬时转染技术制备的重组Fab抗体的质量更优。如果客户要求,我们也可以在大肠杆菌表达系统进行Fab抗体的表达。
由于很多抗体Fab片段不能很好地结合蛋白A、蛋白G或蛋白L亲和树脂,我们通常在抗体重链的C端添加poly-histidine标签,以便于纯化。在设计构建载体时,可在His标签和Fab之间加上蛋白酶识别位点,这样抗体纯化后可通过蛋白酶切去除标签,得到无标签的Fab抗体。
如果您之前已在义翘神州订购过CRO服务项目,一般情况下,您不需要为抗体制备订单支付预付款。义翘神州会根据抗体制备项目的具体费用进行报价,您在收到纯化抗体和发票后付款即可。但是,对于风险性较大的抗体制备项目,例如,制备恒定区有修饰的抗体,义翘神州需要收取少量的成本费用,用于可行性试验和工艺开发(如需)。
更多详情可以关注:抗体Fab片段表达与纯化https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production