义翘神州的哺乳动物瞬时表达系统以HEK293细胞和CHO细胞为表达宿主，可提供灵活的服务以满足不同的定制需求，包括标签去除、内毒素去除、SEC-HPLC检测、糖基化分析等。专有的高密度细胞培养技术，结合自主产权的转染试剂和培养基配方，以及高效表达载体，实现降本增效，提高表达成功率，帮助客户节省成本。下面是关于哺乳动物细胞瞬时表达的常见问题解答：

问题一：如何选择哺乳动物瞬时表达系统，HEK293 还是 CHO？

由于具有易于转染、蛋白表达水平高和工作流程稳定的特点，因此人胚胎肾细胞 (Human Embryonic Kidney 293 Cell, HEK293) 是哺乳动物细胞蛋白瞬时转染的首选细胞系。但当开发治疗性蛋白或者治疗性抗体的商业化重组生产时，中国仓鼠卵巢细胞 (Chinese Hamster Ovary Cell, CHO) 是首选的细胞系。大约 70% 获批的生物治疗蛋白是在稳定转染的CHO细胞中产生的。

HEK293:

? 易转染，转染效率高

? 适用于悬浮培养

? 瞬时表达

? 可靠且灵活的细胞生长

CHO:

? 难转染，转染效率低

? 适用于悬浮培养

? 瞬时表达和稳定表达

? 稳转重组蛋白产量高和Qp (细胞单位生产率) 高

问题二：什么情况下建议选择哺乳动物表达系统？

哺乳动物表达系统能够进行蛋白质折叠和完整的翻译后修饰（例如糖基化、磷酸化等）。哺乳动物细胞表达的重组蛋白，其分子结构、理化结构和生物学功能大多接近于天然蛋白。当目的蛋白属于这种情况，推荐使用哺乳动物表达系统。

问题三：HEK293和HEK293T有什么区别？

在原代人胚肾细胞转入了一段修改后的5型腺病毒DNA片段，得到的细胞即为HEK293细胞。HEK293的衍生株包括HEK293T、HEK293E、HEK293A和HEK293F 等。在HEK293细胞中转入SV40 (Simian Virus 40) 大T抗原，得到的细胞即为HEK293T细胞。HEK293T具有新霉素抗性和对温度敏感。

HEK293T细胞能稳定表达SV40大T抗原。包含SV40复制起点的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增，促进蛋白的表达。HEK293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产，还可用于病毒蛋白生产。

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