石蜡组织切片制作流程及注意事项详解
发布时间:2023/8/1 15:44:00石蜡组织切片制作是取材、固定后的组织经冲水后,分别进行脱水、透明、浸 蜡和包埋,包埋好的组织块即可按需要进行 切片。
①脱水是借某些溶媒置换组织内水分的过程。因水不能与石蜡相混合,故石蜡包埋前必须脱去组织块中的水分,常用的脱水剂有乙醇、丙酮、正丁醇、叔丁醇等。
②组织脱水后,为使石蜡能进入组织块,经过如二甲苯、苯、甲苯、氯仿等既能与酒精混合,又能溶解石蜡的透明剂的媒介作用,而达到石蜡进入组织块的目的。在这一过程中,因组织块中的水分被溶剂取代,其折射指数接近于组织蛋白的折光指数,组织块变得透亮,因此称为透明。
③组织经透明后,在溶化的石蜡内浸溃的过程称浸蜡。用其他浸透剂如火棉胶、碳蜡和明胶等渗入组织内部的过程称为浸透或透入。为使石蜡充分渗入组织块中,常需经过2?3次石蜡浸溃才能完成。
④包埋的目的是使组织块保持定的形状和硬度,以便在切片机上切成薄片。常用的有石蜡包埋和冷冻包埋两种方法,包埋时应把欲观察面朝下。
⑤组织经包埋后即可用轮转式或滑动式石蜡切片机制成切片。石蜡切片法是病理学诊断中常用的制作切片方法。
⑥将切片载于玻片烘干进行染色,染色后的切片覆以盖玻片用树胶封片,以便观察、摄影及较长时间保存。
石蜡组织切片制作注意事项:
石蜡切片取材时要注意:
(1)取材动作要迅速,不宜拖太久,以免组织细胞的成分、结构等发生变化。
(2)切片材料应根据需要观察的部位进行选择,尽可能不要损伤所需要的部分。
石蜡切片固定时要注意:
(1)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。
(2)有些混合固定液的成分之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。
(3)固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1-2次新液。
(4)材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外贴上标签,并随同材料在溶液中投入相应的标签,以免混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字,用黑色铅笔写。
石蜡切片脱水时要注意:
(1)脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。
(2)在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。
(3)在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。
(4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。
(5)如需过夜,应停留在70%酒精中。
(6)脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象
石蜡切片透明时要注意:
(1)使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。
(2)更换每级透明剂,动作要迅速,一方面为了不使材料块干涸,另一方面能避免吸收湿气。
(3)在透明过程中, 如果材料周围出现白色雾状,说明材料中的水未被脱净,应退回纯酒精中重新脱水,然后再透明。
石蜡切片脱蜡时要注意:
(1)尽量保持在较低温度中进行,以石蜡不凝固为度;
(2)透蜡温度要恒定,不可忽高忽低;
(3)操作要迅速,尽量在最短的时间内完成石蜡透入过程,以免引起组织变硬、变脆、收缩等。
义翘神州提供石蜡组织芯片定制服务,服务内容:
①样品要求
石蜡包埋块
②服务流程
接收样品→HE染色→寄回客户选点→石蜡芯片制作→说明书制备→交付
③服务周期
7-30天
④交付产品
1、石蜡组织芯片;
2、说明书一份。
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