小鼠单克隆抗体制备的利弊及制备过程
发布时间:2023/8/1 15:19:00小鼠单克隆抗体是由激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单克隆杂交瘤细胞产生的。鼠单克隆抗体可针对单一抗原决定簇,特异性高,传代稳定,可大规模重复生产,在基础研究、医学诊断、肿瘤靶向治疗、放射免疫显影等多个领域有着广泛的应用。基于杂交瘤技术,义翘神州可制备高灵敏度、高特异性的鼠单克隆抗体,还可以按客户要求提供灵活的定制化方案,旨在为客户提供高品质精品抗体。 我们的定制鼠单克隆抗体生产服务可根据您最终应用要求,制定个性化免疫、筛选及检测方案,以满足您的验证要求。义翘神州拥有大规模杂交瘤抗体生产经验,可提供从毫克到克的抗体生产。另外,如果您的项目时间很紧张,您还可以选择我们的快速鼠单克隆抗体制备服务。
单克隆抗体制备过程:
单克隆抗体的制备主要分为三个步骤:1. 免疫原的选择和制备;2. 混合和筛选;3. 克隆和扩增。
第一步骤,需要选择适宜的免疫原。一般情况下,免疫原可由蛋白质、肽或药物等构成。免疫原通常会注射到小鼠或其他哺乳动物中,以激发其免疫反应产生抗体。
第二步骤,需要从免疫动物的脾脏或其他淋巴组织中获取B淋巴细胞,然后将其与肿瘤细胞融合生成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞具有不断分裂并维持特异性抗体合成的能力。
第三步骤,需要从杂交瘤细胞群体中筛选并挑选出产生目标单克隆抗体的正常杂交瘤细胞,并将其扩增。
单克隆抗体的优缺点:
1.单克隆抗体的优点:
(1)杂交瘤可以在体外“永jiu”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
2.单克隆抗体的缺点:
(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
(3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高
目前义翘神州提供鼠单克隆抗体服务,服务内容:
①抗原复核
UV及SDS-PAGE分析
②标准免疫及血清效价检测
免疫前采血
5只Balb/c小鼠免疫
血清效价检测
最终采血
③融合及筛选
融合及筛选
亚克隆及细胞扩增
细胞建库
④抗体生产纯化及QC鉴定
适当规模的杂交瘤细胞培养
蛋白A纯化抗体
SDS-PAGE及UV分析
ELISA鉴定
⑤交付内容
2-5株ELISA阳性克隆 (每个克隆2管冻存细胞)
0.1-0.5mg纯化抗体/克隆
质量检验报告 (CoA)
剩余抗原 (若义翘制备抗原, 提供0.1-0.5mg纯化蛋白或2mg游离多肽)
更多详情可以关注标准鼠单克隆抗体制备服务:https://cn.sinobiological.com/services/mouse-monoclonal-antibody-service