谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是一个由211个氨基酸组成的大小为26kDa序列，它是另一种广泛使用的可提高靶蛋白的溶解度亲和标签。GST标签与固定化的谷胱甘肽具有亲和力，常用于原核表达。它可以与一个蛋白的N端或C端融合。

谷胱甘肽亲和是一种有效的一步纯化GST(谷胱甘肽S-转移酶)标签蛋白的方法。GST可作为一种可溶性蛋白在大肠杆菌细胞质中大量表达，并具有完全的酶活性。此外，许多在大肠杆菌中表达时不溶的真核蛋白，在表达为GST标签蛋白时被证明至少部分可溶。

GST标签蛋白纯化原理:

重组标签蛋白纯化利用谷胱甘肽的结构能够和GST〔谷胱甘肽S-转移酶〕的结合位点互补,谷胱甘肽通过SH基团与琼脂糖介质上的环氧乙烷基团通过环氧激活特异性偶联在琼脂糖介质上,带有GST的标签蛋白与琼脂糖介质上交联的谷胱甘肽配体互补性结合,这种可逆性的结合在温和、非变性的条件下通过参加复原型谷胱甘肽洗脱下来,杂质通过结合缓冲液被洗脱去除,从而别离目的蛋白。

GST标签纯化蛋白的优缺点：

优点：

1.适用范围广，可在不同宿主中表达；

2.增强外源蛋白可溶性；

3.可用不同的蛋白酶进行去除；

4.有助于保持蛋白的抗原性与生物活性，提高外源蛋白的稳定性；

5.特异性好，纯化方便且温和。

缺点：

1.分子量较大，可能会影响蛋白质的功能和下游实验；

2.仅能纯化可溶性蛋白，若蛋白不可溶，则很难用变性的方法纯化。