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上海沪鼎为您讲解ELISA试剂盒样本收集处理方法有哪些?
发布时间:2015/9/16 10:34:00ELISA试剂盒样本收集处理方法:
1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测:收集血液的试管应为性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
3.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
4.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
5.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测.
6.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7.样品收集后若不及时检测,请按使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融,1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。
8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。