人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒操作步骤说明

发布时间:2015/3/6 11:07:00


ELISA试剂盒操作步骤:
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
ELISA试剂盒注意事项:
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。