秘诀:ELISA试剂盒实验技巧。

发布时间:2014/12/12 10:45:00

秘诀:ELISA试剂盒实验技巧。

 在储存和温育时避免强光直接照射。上海劲马生物建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。
 检测系统是应用于在最敏感的技术手段,免疫反应的研究和试剂盒生产,起着非常重要的作用。操作步骤虽然看起来比较简单,但实验过程有许多需要掌握的地方。在实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。

·加样步骤的经验总结:
 加样或加试剂时,请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。加样时间(包括标准品及所有样品)控制 在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
·如何防止常见ELISA试剂盒样品蒸发?
 试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标 板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20min以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。