产品特点：

本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行PCR扩增的试剂盒，它具有下列特点:

1. 操作简单，免去DNA提取、蛋白去除、RNA去除等步骤，5分钟即得用于PCR的模板。

2. 兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品（包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡）、石蜡组织切片等。

3. 提供离心管专用研磨杵，便于处理棘手样品。

4. 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。

5. 尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。

6. 本试剂盒可以处理100份不同的样品，足够100次PCR实验。

溶液A、溶液B和离心管专用研磨杵可以常温和放置，PCR MagicMix 3.0需要低温运输、-20℃保存。有效期一年。

使用方法：

1. 首次使用本产品时需要详细检查溶液A和溶液B是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未用完部分可以放常温保存。

2. 根据材料不同参考下表取少量样品到1.5 mL塑料离心管中。

注意：未列出样品，用户需要自己摸索用量。对富含多醌多酚的植物材料（如棉花），组织使用量不要超过0.5mg。

3. 加入100 uL溶液，确保溶液A完全将样品淹埋。

4. 用研磨杵小心将样品在离心管内捣碎。血液一般情况捣碎30秒即可；实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊（植物叶片的话，溶液的颜色将变成绿色）。如需更多研磨杵，可从百奥莱博公司另购。对棘手的样品，还可以增加95℃保温10-60分钟一步，待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。

5. 加入100uL溶液B，震荡10秒混匀。

6. 常温12000rpm离心2分钟。

7. 将上清液转移到一个干净的1.5mL离心管中。如果不用，可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR，请直接进入下步。

8. 直接用裂解液作为模板设置30 uL体系的PCR反应体系如下：

成分

用量

PCR MagicMix 3.0

15 uL

细胞裂解液（来于上步）

1-5 uL

自备PCR引物1（10uM）

1 uL

自备PCR引物2（10uM）

1 uL

补水到

30 uL

注意：裂解液体积不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量，则PCR体系应该相应的增加。如果加入5 uL裂解液，则可以使用50 uL的PCR体系。

9. 放入PCR仪中进行PCR,PCR参数需要根据引物Tm值和靶分子长度等参数设置。一般不低于35次循环。

10. PCR结束后取5-10 uL直接上样电泳（本产品不需要上样液），红色染料电泳速度相当于50 bp DNA片段。

注意：

1．如果反应体系不是30 uL，各成分需要等按比例增加或减少。

2．如果细胞裂解液中有不明PCR抑制物（植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物），可以在PCR体系中加入1/10的PCR抑制物清除剂（CAT#：60804，30uL体系中加3uL），可能会对PCR有帮助。