本产品是用于一管式双链cDNA 合成的试剂盒。cDNA 链合成的原理是以OligodT 为通用引物的、MMLV 催化的逆转录反应cDNA 第二链合成的原理是用RNase H 使RNA-DNA 杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I 通过切口平移(nick translation)反应进行RNA 链取代合成cDNA 第二链

本产品具有下列特点：

1. 即开即用，含有合成两条cDNA 链的所有试剂。

2. 适用于含poly rA 的RNA，对不含poly rA 的RNA（如细菌RNA），不能使用本试剂盒制备ds cDNA。

3. 一管式进行，链cDNA 合成后不需要任何处理，直接进入第二链的合成。

4. 所得双链cDNA 可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等。

5. 本试剂盒足够10 次80uL 体系的双链cDNA 合成反应。

6. 如果需要合成全长cDNA，选用SMART 全长cDNA 双链合成试剂盒。

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

一：mRNA 的制备

本试剂盒不提供mRNA 提取试剂，用户需自备相关试剂。

二：双链cDNA 的合成

1. 在一个干净的塑料离心管中

2. 注：如果不需要将双链cDNA 平末端化，则可以跳过T4 DNA 聚合酶处理步骤。

3. 2. 电泳5uL 检测cDNA 质量。如果cDNA 在0.5-10Kb 的范围内呈模糊一片，则cDNA 合格。如果没看见cDNA 或有其他异常，需查找原因后再继续。

4. 3. 所得cDNA 可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。