产品特点：

本产品是专用于血清(血浆)等液体样品中提取病毒RNA的纯化试剂。本产品回收率极高,尤其适合于整合到临床RT-PCR检测试剂盒中。且能用于提取其他液体样品和微量样品。

1. 回收率达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。

2. 灵敏度高，RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50-100拷贝/mL(对HIV和HCV)。

3. 一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。

4. 无毒环保，不需要使用苯酚和氯仿等有毒的有机溶液。

5. 可放量，如果加上病毒离心富集步骤，每管最多可以处理样品1.5 mL。

保存条件：

常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作

1. 血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。

2. 用于制备血浆的全血在2-25℃放置的时间不能超过6小时，在此时间内，可以室温800-1600g离心20分钟，上清即为血浆。

3. 血浆可以在2-8℃或更低温度下运输，可以在室温放置一天，2-8℃放置5天，-20℃以下长期保存。

4. 血浆按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。

5. 实验前所有试都必须放置在室温。

6. 实验当天新鲜配制70%的乙醇。

二：病毒提取操作

1. 标记1.5-2 mL螺旋盖塑料离心管(如Sarstedt CAT#:782.694.006)，为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。注意设置阳性和阴性对照。

2. 每管（包括正负对照管）中加入0.6 mL病毒RNAOUT溶液（需提前融化）。

3. 快速震荡样品几秒，再短暂离心，取0.2 mL液体样品加入到已经装有0.6 mL病毒RNAOUT溶液的管中。如果病毒需要富集，可以将1.5 mL液体样品在4℃ 24,000 g冷冻离心60分钟, 移弃1.3 mL上清后在取用样品。

4. 在正负对照样品管中分别加正负对照样品。

5. 室温放置10分钟。此间可以在每个管上做个标记，以在下步区别向心面和离心面。

6. 振荡数秒后加入0.7 mL室温异丙醇，旋紧盖后振荡30秒混匀，把离心管的向心面对向转头的中央，13,000-15,000 g室温离心至少15分钟。

7. 小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀（此时可能看不见）。

8. 加入1.0 mL 室温70%乙醇, 振荡数秒后 15,000 g室温离心5分钟。注意：在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。

9. 小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀（此时呈膜状沉淀）。

10. 再短暂离心数秒, 用移液器移弃残留液体（70%乙醇），否则它会影响后续反应。

11. 加入200 μl RNase-free水或百奥莱博的1X液相RNase Erasol(能灭活残留的RNase, 而RNase-free水无此功能)，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状RNA沉淀，溶液将呈混浊状,含少量不溶物。由于不溶沉淀物中含有RNA，所以不要离心后取上清使用，必须取混合液使用，哪怕很浑浊。

12. 直接取适量用于RT-PCR，如果溶于200 uL水,同时样品使用量不超过RT-PCR体系的1/2，不溶物一般不会影响RT-PCR。剩余样品可以室温放置2小时，也可保存于-80℃保存一个月。