增强型DAB显色试剂盒说明书

发布时间:2017/5/9 10:08:00

产品特点:

增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂,适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物,可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量,进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。

本产品具有下列特点:

1. 即开即用,不需要用户准备任何材料。

2. DAB以干粉提供,方便运输。

3. 可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。

4. 跟PVDF膜、尼龙膜兼容。

5. 显色过程中需要避光,在显色后可拍照或扫描。

注意:本产品可以配制100mL增强型DAB显色液,但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。

常温运输,4℃保存,有效期1年

使用方法:

注意:DAB有毒性,处理时需要戴手套。

1. 从DAB溶解液中取5 mL到一个10 mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供),将100 mg DAB干粉全部加入,充分振荡混匀,所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果不能用完,可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。

2. 按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量,并按下表配制DAB显色液(此处以配制10 mL为例,用户如需要配制其他体积

3. 如果是印迹膜,则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中,室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟,最长不超过10分钟,具体跟靶分子浓度密切相关),迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃,终止显色反应。数分钟后需要换水,共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分,照相处理后避光干燥保存印迹膜。

4. 如果是组织切片,则直接将DAB染色液滴加在切片上,室温避光放置10分钟,然后浸在超纯水中数次,空气中干燥后显微镜下检测或照相。