非酶多糖清除剂(DNA专用)说明书

发布时间:2017/5/9 10:15:00

产品特点:

用很多方法提取的植物、真菌或细菌基因组DNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide,PS)污染,这些污染会严重影响下游的酶切和PCR等实验。为此百奥莱博开发了非酶法多糖清除剂(DNA专用),它具有下列特点:

1. 高效,能有效地去除基因组DNA中的多糖污染,使DNA溶液不再粘稠。

2. DNA分子完整性不会受到任何影响。

3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要二十多分钟。

4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和保存。

常温运输及保存,有效期一年。

使用方法:

1. 如果DNA溶液的体积不够100 uL,用水或TE补到100 uL。如果超过100uL,可以用我公司的核酸浓缩液(需另买)浓缩到100 uL,或者分成几个100 uL再处理。

2. 将50 uL溶液A加入到100 uL待处理的DNA样品中,充分吹打混匀。

3. 15 uL的溶液B,充分吹打混匀。如果溶液B过于粘稠,可以先在65℃保温后再取用。

4. 加入150 uL的氯仿,充分振荡半分钟。

5. 12000-15000 g离心2分钟,小心转移上清到一新的1.5 mL塑料离心管中,交界处将有白膜样的多糖沉淀。

6. 重复上步操作,白膜样的多糖沉淀将减少。是否需要继续此步操作根据多糖污染严重程度决定。可以一直重复直到白膜不再出现。本产品提供的溶液B的量足够抽提5-6次。

7. 在得到的上清液中加入两倍体积(200 uL)的微量核酸沉淀剂,混匀后12000-15000 g离心10-20分钟,小心弃上清。注意不要触及DNA沉淀。

8. 加入1 mL自备的75%乙醇, 振荡器上短暂振荡数秒后12000-15000g离心2分钟,小心弃上清。注意不要触及DNA沉淀。

9. 短暂离心数秒,用移液枪小心吸去残留液体(约50 uL)后,加入适量自备TE,立即电泳检测,OD检测后放-80℃长期保存。