柱式DNA清除剂说明书
发布时间:2017/5/9 10:13:00产品特点:
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。
本产品是的非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品,可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。????????开发的柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。
1. 操作更加简单快速,全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达80%以上。
3. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平,而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
常温运输和保存
使用方法:
1. 将50 ul总RNA溶液与溶液A按1:1的比例混合,充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如钠离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA溶液的量不足50 uL,加无RNase水补足到50 uL以便后续操作。
2. 加入相当于RNA溶液和溶液A混合液总体积9倍体积的溶液B,颠倒数次充分混匀。注意:溶解溶液B沉淀。溶液B在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中,室温12000 rpm离心半分钟,弃穿透液。
4. 加0.7 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
5. 洗涤一般足够去除杂质。如果有必要,可以再加0.3 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rpm室温离心半分钟并弃穿透液。一般情况,此步可以省略。
6. 加0.7 mL溶液C到离心吸附柱中,12000 rpm室温离心半分钟,弃穿透。
7. 室温12000 rpm离心半分钟。此步十分重要,否则会影响RNA的使用。
8. 将离心吸附柱转移到一个新的1.5 mL离心管中,加入30-50 uL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。室温12000 rpm离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。