植物细胞质蛋白提取试剂盒
发布时间:2017/5/2 9:45:00产品组成:
规格 50T 100T
提取液A 25ml 50ml
植物胞质蛋白提取液B 2.5ml 5ml
蛋白酶抑制剂混合物 250ul 500ul
注:
● 蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
● 蛋白酶抑制剂混合物:包含6种独立的蛋白酶抑制剂。
注意:
1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。
储存条件:
蛋白提取液2-8℃保存;
蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管
底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清
洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
????植物细胞质蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞和各种实体植
物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞质蛋白。提取过程简单方便,可在1 小时
内完成。制备的蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于
Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白
研究。
产品特点:
1、使用方便。
2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
3、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包
含6 种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
?? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液制备:每500ul 预冷的蛋白提取液A 中加入2ul 蛋白酶抑制剂;每200ul
蛋白提取液B 中分别加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 植物组织样本剪碎,采用以下一种方
法处理:
A、加入 500ul 提取液A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。
B、置于研钵中用液氮研磨,研磨后加入 500μl 冷的提取液 A。
C、加入 500ul 提取液A 直接置冰上研磨。
3. 高速涡旋振荡 5 秒,然后在4℃,100×g 力条件下离心1 分钟。
4. 收集上清,弃沉淀。
5. 将上清在 4℃,600×g 力条件下离心1 分钟。
6. 收集沉淀,将上清移入另一干净的离心管。
7. 在步骤 6 中的上清中加入50ul 胞质提取液B,高速涡旋振荡15 秒,充分混匀。
8. 置冰上 40 分钟,每隔10 分钟高速涡旋振荡15 秒。
9. 在 4℃,16000×g 条件下离心10 分钟。
10. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到细胞质蛋白。
11. 将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
注:
① 建议用BCA 法进行蛋白定量。
② 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。