柱式DNA PAGE胶回收试剂盒说明书

发布时间:2017/5/2 10:13:00

产品特点:

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离小片段DNA的主要方法,但是目前市场上没有专门的产品用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段,本产品就是百奥莱博专门为此用途而开发的、从PAGE凝胶中回收DNA片段的试剂盒。它具有下列特点:

1. 高效,采用高效的溶液使DNA快速从PAGE中扩散出来,使回收效率50-90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。

2. 可回收50 bp-500 bp的DNA片段(如果片段长度超过5100bp,建议使用琼脂糖分离回收方法)。本产品也能回收单链DNA。

3. 操作简单,整个过程只需要离心机,不需要其他设备。

4. 纯度高,采用能专一结合DNA的硅胶膜是杂质和DNA分离,回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。,

5. 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。

常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期一年。

使用方法:

1. 切取含DNA片段的PAGE凝胶(100 mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5 mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。

2. 按重量比为1:2的比例加入溶液A(100 mg PAGE凝胶需要加入200 uL溶液A)。

3. 将离心管水平放置并室温摇晃1-10个小时以让DNA从PAGE凝胶中扩散出来。如果DNA片段超过500 bp,摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃,DNA扩散速度会增加。

4. 12000-15000 g室温离心2分钟,将含DNA的上清液转移到新的离心管中。

5. 再用100 uL的溶液A洗涤凝胶并与上步得到的上清合并。

6. 加入900 uL通用溶胶液和0.3 mL溶液B,混合均匀后将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000-15000 g离心1分钟,倒掉收集管中的液体。

7. 加入600-800 uL通用洗柱液于离心柱中。

8. 12000-15000 g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。

9. 12000-15000 g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。

10. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入25-50 uL 通用洗脱液,静置3分钟。

11. 12000-15000 g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。