储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；

磷酸酶抑制剂 2-8℃保存；

蛋白提取液室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

????总蛋白提取试剂盒（2D 电泳用）适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白直接用于双向电泳。

产品特点：

1、使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

细胞总蛋白提取：

1. 提取液制备：每 500ul 的总蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物，混匀后备用。

2. 取 5-10×106 个细胞①，在4℃，2500g 条件下离心5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 5×106 个细胞中加入500ul 的总蛋白提取液，混匀后，振荡15-20 分钟。

5. 在 14000g 条件下离心15 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。

7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。

注：

① 细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。

② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。

③ 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

组织总蛋白提取：

1. 提取液制备：每 500ul 的总蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物，混匀后备用。

2. 取 100mg 组织样本剪碎，加入总蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体①。

3. 将组织匀浆吸入干净离心管中，在 14000g 条件下离心5 分钟。

4. 将上清吸入另一干净离心管，即可得到总蛋白。

5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

注：

① 用液氮研磨的方法更佳，具体方法可以联系本公司18518407031@163.com 索取详细资料。