大提柱式DNA清除剂说明书
发布时间:2017/5/11 9:44:00本产品是的柱式DNA清除剂(BTN90318)的大提升级产品,可用 于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很 大缺陷。本公司开发的大提柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有下列特点。
1. 处理量大,可以处理高达400ug的总RNA。
2. 操作简单快速,全部操作只需要十余分钟。
3. 回收率高达80%以上。
4. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平,而 RNA分子完整性不受任何影响。
5. 本身不含RNase污染,避免了用DNase处理的问题。
6. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
7. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
常温运输、除溶液 A 需要 4℃保存外其余均可室温保存、有效期一年。
使用方法:
1. 将 1 mL 总 RNA 溶液与 1 mL 溶液 A 加入一个自备的 30-50mL 塑料离 心管中,并充分震荡 1 分钟。注意:RNA 溶液中盐(如钠离子)的浓度 不能高于 0.2 M,如果 RNA 溶液的量不足 1 mL,加自备的无 RNase 水补足到 1 mL 以便后续操作。
2. 加入 9 倍体积(即 18mL)的溶液 B,颠倒数次充分混匀。注意:溶液 B 在 4℃放置后可能会产生沉淀,用前需检查,如果确实有沉淀,必须放 在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中,室温 5000-7000 rpm 离心一分钟,弃
穿透液。
4. 加 10 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温 5000-7000 rpm 离心一 分钟,弃穿透液。
5. 洗涤一般足够去除杂质。如果有必要,可以再加 10 mL 通用洗柱液 到离心吸附柱中,室温 5000-7000 rpm 离心一分钟,弃穿透液。一般 情况,此步可以省略。
6. 室温 5000-7000 rpm 离心一分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗 柱液会影响 RNA 的使用。
7. 将离心吸附柱转移到一个新的自备的 50 mL 塑料离心管中,加入 0.5 mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。室温 5000-7000 rpm 离心一分钟, 离心管中溶液即为 RNA 样品。
8. 由于离心吸附柱吸附能力强,还有大量 RNA 吸附在柱上,所以还需要加 入 0.5 mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。室温 5000-7000 rpm 离 心一分钟。
9. 两次收集的 1mL RNA 样品,可以立即使用,也可以存放于-80℃待用。