TMB 因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方，辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物，适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。即开即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。

1. 相对于DAB 来说，灵敏度高。

2. 色泽稳定，无须避光显色。

3. 色带为蓝色，便于观察。

4. 无毒环保，可以放心使用。

常温运输，4℃避光保存，有效期一年。

使用方法：

一、免疫印迹染色

1． 准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗（或生物素）

处理、辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步

骤

2． 加入1 滴溶液A 和1 滴溶液B，铺满整个固相膜表面（可按比例增减）。

3． 置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2-5 分钟，直至深蓝色沉淀出现。

4． 用镊子夹起固相膜，放入去离子水中清洗。

5． 空气中晾干。

6． 拍照记录。

二、免疫化学染色

1． 准备好含有待测蛋白的组织切片：包括固着、封阻、一抗（或生物素）处理、

辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步骤。

2． 加入1 滴溶液A 和1 滴溶液B，铺满整个固相膜表面（可按比例增减）。

3． 室温下，小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。

4． 室温下孵育5-10 分钟，或直至样本出现深蓝色。

5． 小心移去切片上显色工作液。

6． 室温下，小心将切片置入50 毫升PBS 缓冲液中浸泡5 秒。

7．小心移去切片上的PBS 缓冲液。

8． 放上盖玻片或封片。

9．（选择步骤）进行甲基绿复染。

10．立即在一般光学显微镜下观察：阳性呈现深蓝色。

注意事项：

1． 加入1 滴溶液A 和1 滴溶液B，可按比例增减

2． 如果封闭欠佳，易造成背景颜色过深

3． 固相膜显色后数小时将会褪色，不能存在。

4． 该显色液只能用于辣根过氧化酶（HRP）标记的杂交和沉淀反应。

5． 染色后可用甲基绿或苏木素复染，增强对照。