本产品具有从双链DNA的3′-OH末端降解生成5′-单核苷酸的3′→5′外切酶活性。本酶对双链DNA具有高度特异性，能降解平滑末端、3′凹陷末端及有切口的DNA，但是不能降解3′-突出末端。所以，可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解（Double digestion）后，利用核酸外切酶III的3′→5′的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5′-P单核苷酸。与核酸酶相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的删除制作。

本产品主要用途：

1. 通过部分降解双链DNA片段，产生一部分单链DNA片段，作DNA聚合酶的底物（生成的DNA可用于双脱氧法序列分析）。

2. 与单链特异性核酸酶（S1 核酸酶或绿豆核酸酶）合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性，对于双酶切DNA片段（例如EcoR I-Pst I 片段）能制作单向（EcoR I方向）缺失的DNA。

3. DNA-蛋白质相互作用分析。

低温运输，-20℃保存，半年以上长期保存时请在-80℃冷冻保存

相关缓冲液的组成

1. 10×核酸外切酶III缓冲液配方是500 mM Tris-HCl（pH 8.0）、50 mM MgCl2和10 mM DTT。

注：本缓冲液与活性定义所用缓冲液有相同成分。本缓冲液含有实验所需主要成分，如质粒DNA缺失突变体的构建实验。

2. 核酸外切酶III贮存缓冲液配方是25 mM Tris-HCl（pH 8.0）、50 mM KCl、0.5 mM DTT和50%甘油。

酶活性定义

以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH 8.0的条件下，30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。活性定义反应液配方是50 mM Tris-HCl（pH 8.0）、5 mM MgCl2、1 mM DTT和300 μM 底物DNA。

纯度

1. 50 U的本酶和1 μg的Closed circular (RF I) pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

2. 50 U的本酶和1 μg的pBR322-Pst I/BAP分解物在37℃下反应30分钟，DNA的电泳谱带与对照一致。