DNA PAGE胶回收试剂盒说明书

发布时间:2017/5/11 21:43:00

本试剂盒是专门用于从PAGE凝胶中回收DNA片段和OLIGO的产品。它具有下列特点:

1. 适合于回收100 bp以下的DNA片段,包括长度在20nt左右的OLIGO。

2. 操作简单,只有浸泡和离心两步。

3. 回收率在70%以上(具体跟DNA的长度和浸泡的时间密切相关)。

4. 纯度高,本试剂盒回收的DNA和OLIGO可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。

5. 本产品既能回收双链DNA片段,也能回收单链DNA(包括OLIGO)。

常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期为一年。

使用说明:

1. 进行PAGE 电泳,电泳后染色观察DNA 并确定需要回收的DNA 条带的位置。注意:为避免UV 对DNA 的伤害,使用能在日光下使DNA 显示条带的染料DNAGREEN(CAT#:BTN70303)。

2. 小心切取含DNA 片段的PAGE 凝胶。尽可能多地把多余的胶切除,否则多余的胶会影降低DNA 的回收效率。胶的重量控制在0.3 克以下为宜。

3. 将凝胶块转移到一个干净的1.5 mL 塑料离心管中并用移液枪头充分将凝胶块捣碎。

4. 加入0.3 mL 溶液A,将离心管平放摇晃1-10 小时。如果DNA 片段长度在100 bp左右,摇晃1-3 小时就足够;如果长度在300 bp 以上,摇晃过夜。

5. 12000-15000 g 离心3-5 分钟,小心将上清液(含DNA 片段)转移到一个新的1.5 mL 塑料离心管中。

6. 在凝胶沉淀中加入0.2mL 溶液A, 充分吹打。

7. 12000-15000 g 室温离心3-5 分钟,小心将上清液(含DNA 片段)转移到第五步使用的同一塑料离心管中。

8. 加入2 倍体积的溶液B,充分颠倒混匀。

9. 12000-15000 g 室温离心10-15 分钟,DNA 将在管底形成细小的沉淀。小心移弃上清。

10. 加入1 mL 溶液C, 振荡一分钟。12000-15000 g 室温离心3-5 分钟后小心移弃上清。

11. 开盖室温静置,直到管中液体挥发。

12. 加入20-50uL 通用洗脱液溶解管底的DNA 沉淀,得到的溶液可以立即使用或低温保存。