重组蛋白N端的GST谷胱甘肽S转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化GST标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列特点：

1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达GST标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。

2. 专一性强，过柱即可获得纯度高达95%的GST-标记蛋白。

3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的GST标记蛋白。

4. 每次可以处理20 mL的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。

5. 提供4 mL 浓度为50%的谷胱甘肽-Agarose介质，可吸附5-10 mg GST标记蛋白质。

6. 本介质可以反复使用多次。

常温运输和保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF需低温运输。收到货后，介质需4℃保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF需-20℃保存，有效期一年

注意：

1. 每步得到的样品都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照，在下面描述中就不再提醒。

2. 本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供

注意：

1. 每步得到的样品都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照，在下面描述中就不再提醒。

2. 本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供

10. 将第7步得到的上清液（含可溶性GST标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于SDS-PAGE电泳。GST和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在0.2-1 mL/分钟即可。如要提高GST标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。

11. 用0.5-2 mL 1×PBS缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。

12. 用0.2-1 mL GST洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含GST标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或SDS-PAGE电泳）或-80℃长期放置。

13. 对收集的2种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或SDS-PAGE分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用Bradford法或OD检测法（1 OD280约等于0.5 mg/mL蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于GST的分子量为26 KD，所以在SDS-PAGE胶上，GST标记蛋白将比天然蛋白大26 KD。