热启动Taq DNA聚合酶设计用于增强DNA扩增的特异性、敏感性和产量。使用该酶可在室温配制反应体系，使用非常方便。热启动Taq DNA聚合酶是一种重组Taq DNA 聚合酶，蛋白分子氨基酸残基上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性，避免形成引物二聚体和非特异性延伸。从而增加DNA扩增的特异性。95℃加热4分钟可恢复酶活性。活化的酶具有与热启动Taq DNA聚合酶相同的功能：催化5’→3’方向合成DNA、无可检测的3’→5’校正外切酶活性、具有较低的5’→3’外切酶活性。该酶还具有脱氧核糖核酸酶转移活性，在PCR产物的3’-端多加1个腺嘌呤。活化前检测不到这些活性。此产品特点是：

1. 高产量扩增复杂模板。

2. 不需要95℃加热4分钟即可激活酶活性。

3. PCR特异性高-降低错配效应和减少引物二聚体的生成。

4. 增强的PCR敏感性。

5. 使用方便，室温配制PCR反应体系。

6. 扩增产物具有3’-dA突出末端。

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

注意：

以下举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况，设定反应条件。10×HotMaster Taq Buffer 中含有Mg2+，配有浓度为15 mM MgCl2 。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+ ，设置的反应体系。该酶最适延伸温度为65℃，可在60℃-70℃之间调整。

以人基因组DNA为模板，护增1kb的片段

1. 反应体系的建立：50μL反应体系如下（可根据比例放大或缩小反应体系）：

2. PCR反应循环的设置：

3. 结果检测：反应结束后取5 μl 反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。

应用

1. 启动PCR。

2. 高产量扩增长达3kb片段。

3. RT-PCR

4. 特异性扩增复杂cDNA和基因组模板。

5. 扩增低拷贝DNA模板。

6. 实时PCR。

7. 多重PCR。

8. 制备TA克隆用PCR产物。