产品特点：

本产品是Thermus aquaticus（水生栖热菌）的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个氨基酸，分子量为 94 Kd。该酶可以广泛用于PCR，RT-PCR，加尾反应等。

1.耐热DNA聚合活性，该酶在90℃以上几乎无DNA合成，在75～80℃时延伸率约150个核苷酸，70℃时为60个核苷酸/秒，55℃时为24个核苷酸/秒。在65～68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。

2.热稳定，在PCR混合物中95℃保温40 分钟仍可保持50%的活性。

3.Mg2+离子依赖性，MgCl2浓度在2.0 mM时该酶催化活性。

4.本酶无3'→5'外切活性，不具3'→5'校对功能，碱基错配机率为2.1×10-4。

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

以λ DNA为模板进行PCR扩增反应为例

1.按下列组份配制PCR反应液。

Taq DNA聚合酶(5U/ uL)

0.25 uL

10×PCR Buffer(含Mg2+)

5 uL

MgCl2(25 mM)

根据需要补加

自备dNTP（各2.5 mM）

4 uL

模板DNA

见下

引物1（20 uM）

1 uL

引物2（20 uM）

1 uL

灭菌蒸馏水

Up to 50 uL

注：10×PCR Buffer 含15 mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为

1.5 mM），是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。

推荐50 uL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量

哺乳动物基因组DNA

0.5-1 ug

酵母基因组DNA

5-500 ng

细菌基因组DNA

0.5-50 ng

质粒DNA

5-500 pg

PCR回收片段

1-100 pg

2.PCR反应条件

以λDNA为模板，扩增1 kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

94℃ 30 sec.

55℃ 30 sec. 30-35cycles

72℃ 1 min.

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定的反应条件（温度、时间等）。

注意事项

PCR的反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法（Cool Start Method）可增强PCR扩增的特异性，减少PCR过程中的非特异性反应，能得到良好的PCR结果。