藻类蛋白提取试剂盒说明书
发布时间:2017/5/10 22:26:00注:
● 藻类蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放藻类总蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
● 蛋白酶抑制剂混合物:包含6种独立的蛋白酶抑制剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin
A、Bestatin、E-64。
注意:
1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。
储存条件:
蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液室温保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
????藻类蛋白提取试剂盒可以从各种藻类中提取总蛋白,包括蓝藻门的原核藻类和原生生物藻类。也可用于纯化蛋白的粗品制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,可用于各种下游实验。
本试剂盒提取的蛋白不可用于2D 电泳。如下游实验需要用于2D 电泳,请使用其它货号的试剂盒。
抑制剂中不含EDTA,可与金属螯合层析等下游应用兼容。如需EDTA,请自行加入提取液中。
产品特点:
1、使用方便,从藻类中提取蛋白不需经过研磨、超声破碎等前处理。
2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
3、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6 种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
?? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液制备:每 500ul 冷的蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 按每20mg 藻类①样本加入500ul 抽提液A(大约样品体积和提取液体积比1:2-1:3,完全淹没样品即可),混匀后,冰上放置2-3 小时,中间每隔30 分钟振荡混匀30 秒。(或者在4℃条件下振荡20-30 分钟。)
3. 在 4℃,14000rpm 条件下离心15 分钟。
4. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到藻类总蛋白。
5. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注:
① 样本数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
③ 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。