胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B说明书
发布时间:2016/7/3 21:54:00胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B
货号: BL0624
规格:25ml
一、简介
本公司生产的胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B是把高纯度的胰蛋白酶固定到活化好的琼脂糖凝胶上,它可以用于酶切,同时也可以纯化一些能和他结合的物质,如丝氨酸蛋白酶抑制剂等。
二、亲和填料特性
特点 |
基团脱落少,结合特异性强 |
配基 |
胰蛋白酶 |
配基密度 |
≤10mg/mL |
亲和填料的颗粒大小 |
45-165μm |
流速 |
300cm/h |
PH范围 |
1.5-10,在位清洗时PH范围可到1.5-10 |
使用温度 |
4℃~常温 |
保存温度 |
+4~8℃ |
保存液体 |
20%乙醇 |
三、适用范围
胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B用于纯化各种与之结合的物质,如酶抑制剂等。
四、亲和填料应用的注意事项
(1)凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
(2)吸附:20-50mM,PH7.4-8.0含0.2-0.5M NaCL的缓冲液,最常用的为Tris-HCl缓冲液。
(3)洗脱:可以用浓度为0.2-2M的PH1.5-5左右的酸性缓冲液进行阶段或者线性洗脱。
(4)上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的PH、电导相同。
(5)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。
(6)胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HCl PH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1M NaOH含2M NaCl流洗3个床体积,然后用3M NaCL洗3个床体积即可。如果再生的效果还不好,也可以用0.2-0.5M PH1.5的缓冲液冲洗3-5个柱床体积,然后再用水清洗,保存在20%乙醇中即可。长期不用加抑菌剂如0.2%叠氮钠,酸洗柱子的时间不能太长,否则会缩短填料的寿命。
(7)该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。