产品简介：

3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)是非常优越的酶免试验显色剂，能溶解 于多种有机溶剂

和双蒸水中，为稳定的无色溶液，与适量过氧化脲或双氧水与缓冲液混匀后，与过氧化物酶

作用产生清晰的蓝色产物，极易观察。由于其灵敏度高，配制后的 工作液稳定，加上无致癌

特性，被广泛用于酶联免疫(ELISA)试验和尿试纸的检测反应等。TMB 主要应用于酶联免疫

吸附实验(ELISA)，经典的方法是采用 A、B 液分开配制，使用前再混合的方法，并且长期

存放稳定。本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色。

 TMB 显色液特点是：灵敏度高，稳定性好，显色终止后读数稳定。背景低：

底物溶液在 650nm 检测时检测 OD 值小于 0.04。

 

 

 

操作步骤(仅供参考)：

1、用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗)，取试剂(A)、(B)、(C)，按 A：B：C= 5000:5000:4

混合，待达到室温后即可使用。

2、加液：加完 HRP 结合物并温育一定时间后，洗板 3～5 次，每孔加 TMB 显色液 100ul。

根据个人实验需要，在室温(15～25℃)或 37℃下温育 10～30 分钟。

3、终止：加等体积的 1M 盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。

4、读数：终止反应后 30min 内在 450nm 处读数。

  

注意事项：

1、 如果出现高的反应背景或沉淀，表明 TMB 底物反应过于强烈。

2、 为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数，或者进一步稀释一抗和/或 HRP 结合物，再

次进行试验。

  

有效期： 12 个月内有效。