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TSK-GEL 离子交换色谱柱
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TSK-GEL 离子交换色谱柱

 

TOSOH 提供了一系列用阴阳离子交换方式进行分析和分离生物分子的高效液相色谱柱.在任何一种离子交换模式既有甲基丙烯酸酯也有硅胶基的色谱柱。蛋白质、多肽、DNA和、核苷酸衍生出来的RNA 以及其他核酸片断都是TSK-GEL阴离子交换色谱柱分析分离的典型样品。基于聚苯乙烯基体材料的阴离子交换柱适合用于小分子量的糖类氨基酸、核酸碱基及小分子的备选药物。

特性 , 优点

新型 BioAssit 色谱柱

l  即使对较大的蛋白质也具有高容量>100KD,

l  取得相同样品量的流动相耗量小

l  具有能提供快速传输的独特孔结构 , 更加尖锐的峰形改善了分析和分离

l  硬件为具有生物相容性的PEEK 柱 , 由于吸附产生的样品损失较小

 

聚合物基的离子交换色谱柱

l  甲基丙烯酸酯骨架化学稳定性（pH2-12）

l  较大的孔尺寸 （1000A） 排出的蛋白质极限为5000，000Da

l  无孔树脂基体柱（(NPR)

l  机械性能稳定

l  耐碱、有机溶剂、改性剂表面剂重复清洗

l  对大多数生物聚合物使用相同住

l  快速QC 分析和工艺监测

l  降低溶剂消耗和 分析时间

  硅胶基体的离子交换色谱柱

较小的孔尺寸2SW =125? 3SW=250? 适合 分析 较小的分子量的样品如核苷、备选药物、儿茶酚、小肽。

TSK –GEL 阴离子交换色谱柱

l  填充了多孔结构和化学键合的树脂TSK gel BIoAssist Q 柱 对分子量大小不同的蛋白质和核酸具有高交换容量。

l  TSK-GEL DNA –NPR 柱可用于 PCR 片段的分析

l  TSK-gel SuperQ－5pw 柱由于采用了 新的键合化学技术，所以比TSK-gel DEAE -5pw柱有更高的交换容量 。

TSK-GEL阳离子交换色谱柱

l  TSK gel BIoAssist S 对中等和大分子量的蛋白质具有高度交换容量

l  因小孔径和大比表面积TSK gelDEAE-2SW 与小分子和中等分子的蛋白质结合能力高于5pw 两倍。

 

TSK 离子交换柱选择

样品类型

分子量范围（Da）

Tsk-gel 柱

pH范围

氨基酸   多肽和蛋白

氨基酸

< 2000

SAX

SCX

1-14

1-14

肽和小蛋白

<10000

SCX

SP-2SW

CM-2SW

DEAE-2SW

QAE-2SW

1-14

2-7.5

2-7.5

2-7.5

2-7.5

多肽和小蛋白

30000

CM-3SW

DEAE-3SW

2-7.5

2-7.5

蛋白

>1

BioAssist   S

 BioAssist Q

 SP-5PW

 DEAE-5pw

 CM-5PW   

 

2-12

                               核酸                            

嘌呤和嘧啶

DEAE-2SW  

SP-2SW

2-7.5

2-7.5

核苷

SP-2SW

DEAE-2SW

2-7.5

2-7.5

核苷酸

DEAE-2SW

2-7.5

寡聚核苷酸

DEAE-5PW

DEAE-NPR

DNA-NPR

SUPERQ-5PW

2-12

2-12

2-12

2-12

DNA   RNA和PCR产品

DNA-NPR

DEAE-NPR

DEAE-5PW

DEAE-3SW

2-12

2-12

2-12

2-7.5

                       其它分子                                     

单双糖

Sugar   AX1 ,AXG

SCX

SAX

1-14

1-14

1-14

有机酸

OAPAK-A

2-12

下面是国内常用的离子交换色谱柱的应用实例

 

下图是用阴离子离子交换色谱柱 TSK-GEL  SUGAR AXG预柱反应后测定各类糖类纤维二糖、麦芽糖、乳糖、鼠李糖、来苏糖、核糖、甘露糖、海藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖等


 

Sample:

糖的标准品

Compound:

1)   Cellobiose, 2) Maltose, 3) Lactose, 4) Rhamnose, 5) Lyxose, 6) Ribose, 7)   Mannose, 8) Fucose, 9) Arabinose, 10) Galactose, 11) Xylose, 12) Glucose

 

Chromatographic   conditions

Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]:

 

1) TSKgel   Sugar AXG, 8640, 4.6*150(mmI.D.*mm), (um), 1

           Mobile Phase:

A: 0.6 mol/l   borate buffer (pH 7.7)B: 0.7 mol/l borate buffer (pH 7.25)
  C: 0.7 mol/l borate buffer (pH 8.7)
  Stepwise gradient

Temperature:70C

Detection:1) FS : ex.: 331 nm em.: 383nm

Injection vol:20ul

Sample load:Each of monosaccharide: 25 umol/lumol/l,   disaccharide: 50umol/l

Note:Post column reactionReaction reagent: 2.5% 2-Cyanoacetamide solution
  Reaction Temperature: 100 C



Source/reference:TOSOH Separation Report   Vol.:   No.: 42   p:7 - 7(2)   ( )

Title:Separation of saccharides on TSKgel Sugar AXG

33.jpg

下面的谱图是采用OAPAK离子排除色谱柱，用离子排除色谱   和不同的检测器，测定各种有机酸 丙酮酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸、焦谷氨酸 、乳酸、醋酸、丁二酸

 

Sample:

有机酸标准品

Compound:

1) Pyruvic   acid, 2) Tartaric acid, 3) Citric acid, 4) Malic acid, 5) Pyroglutamic acid,   6) Lactic acid, 7) Acetic acid, 8) Succinic acid

 

Chromatographic conditions

Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]:

 

1) TSKgel   OApak-P, 16654, 6.0*40(mmI.D.*mm), (um), 1

2) TSKgel OApak-A,   16653, 7.8*300(mmI.D.*mm), (um), 2

Mobile Phase:

0.75 mM   sulfuric acid

Flow rate:

0.8ml/min

Temperature:

60C

Detection:

1) CM  2) UV/VIS : 210nm  3) UV/VIS : 450nm

Injection vol:

20ul

Sample load:

1) 50ppm, 2)   500ppm, 3) 500ppm, 4) 500ppm, 5) 500ppm, 6) 1000ppm, 7) 2000ppm, 8) 1000ppm

Note:

Peak 4':   Degradation product of malic acid
  VIS (450 nm) detection with post-column reaction:
  Reaction solution; 0.2 mmol/l BTB in 15 mmol/l disodium hydrogenphosphate   buffer (pH 8.6)
  Flow rate: 0.8 ml/min