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图文详情
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产品属性
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一 产品规格
1)用于分子量在5,000以下的化合物分离(微孔径8nm、12nm)
色谱柱 | 基材 | 微孔径(nm) | 含碳率(%) | pH范围 | 特点及用途 |
Pro C18 | 硅胶 | 12 | 16 | 2.0-8.0 | l 通用性较高的标准型ODS l 通过独自的合成方法进行了高度的非活性化处理 l 对于碱性化合物的分离良好 |
Hydrosphere C18 | 12 | 12 | l 对于亲水性化合物的分离良好 l 可以用于100%水性流动相 | ||
Pro C18 RS | 8 | 22 | 1.0-10.0 | l 的耐酸、耐碱性 l 对于碱性化合物分离良好 l 对于疏水性大的化合物分离十分良好 | |
ODS-A | 12 | 17 | 2.0-7.5 | l 适用于从分析到大量制备的通用型ODS | |
ODS-AQ | 12 | 14 | l 对于亲水性化合物的分离良好 | ||
Ph | 12 | 9 | l 通过π电子相互作用显示出与ODS相异选择性 | ||
Polymer C18 | 聚合物 | - | - | 2.0-13.0 | l 聚合物类C18 |
2)用于分子量在5,000~100,000左右的化合物分离(微孔径20nm、30nm)
色谱柱 | 基材 | 微孔径(nm) | 含碳率(%) | pH范围 | 特点及用途 |
ODS-A | 硅胶 | 20 | 12 | 2.5~7.5 | l 微孔径大的ODS l 用于蛋白质、多肽的分离 |
30 | 7 | ||||
ODS-AQ | 20 | 10 | l 低碳ODS | ||
C8 | 20 | 7 | l 微孔径大的C8 l 对于疏水性相对较高的化合物的分离良好 | ||
30 | 4 | ||||
C4 | 20 | 5 | l 微孔径大的C4 l 对于蛋白质的分离良好 | ||
30 | 3 | ||||
CN | 30 | 3 | l 氰基的固有选择性 l 用于疏水性大的蛋白质分离 | ||
YMCbasic | 20 | 7 | l 对于蛋白质、多肽的分离良好 l 对胰岛素具有的分离能力 | ||
Protein-RP | 20 | 4 | 1.5~7.5 | l 用于耐酸性很好的蛋白质、多肽的分离 |
二 产品应用
1)多肽(MW573-3,465)的分离
通常用于多肽以外的低分子化合物分离的C18(12nm)色谱柱,也同样适合分子量在5,000以下的多肽分离。尤其对于碱性多肽的分离,实施了高度非活性化处理的Pro系列柱十分有效。
如上图所示,其它公司的亲水化合物分离用ODS柱(Brand E2)对碱性多肽(1和7的色谱峰)显示出拖尾。对此,Hydrosphere C18则显示出良好的分离和的峰形。
2)多肽分析
下图是β-乳球蛋白B的胰蛋白酶消化物的分析例。
由图可见:对于像多肽图析这样的多个多肽的同步微量分析,C18(12nm)的半微米型柱十分有效。特别是YMC-Ultra HT Pro C18 12um柱与5um柱相比,由于其分离能力很高,因此检测出的峰数和灵敏度都有所增加。
3)多肽及蛋白质(MW4,300-17,000)的分离
为考察因微孔径及官能团的不同而造成对分离的影响。下图对于分子量在4,300至17,000的多肽及蛋白质,通过微孔径和官能团各不相同的色谱柱进行了分离比较。
因微孔径不同而造成的影响 因官能团不同而造成的影响
的微孔径和官能团的组合
由上图可见:填料的微孔径和官能团之中的一项没有达到化时,也会发生峰变宽、化合物之间或不纯物峰间的分离不良等现象。
4)蛋白质(MW66,000-96,000)的分离
a) 因分离液的不同而造成对分离的影响(C4,30nm)
在分离蛋白质和多肽时,分离液一般采用含有TFA的乙腈和水的梯度洗脱。
从上图可见:使用C4(30nm)柱的高分子蛋白质的分离中,因用于分离液的有机溶剂的不同会表现出对分离模式的影响。如上图中,对于在乙腈和水性流动相里难以分离的样品,由于添加了2-丙醇等不同种类的有机溶剂而使选择性发生了变化,有时会变得可以分离
b) 因微孔径及官能团的不同而造成对分离的影响
因微孔径不同而造成的影响 因官能团不同而造成的影响
从上图可见:在分离对象化合物分子量在66,000至96,000那样的高分子蛋白质分离中,随着微孔径变小峰形会变宽,分离变得不良。
另外,对于填料的官能团,随着C8、C18和侧链变长疏水性变大,分离会变得不良。像这种填料的微孔径和官能团不适合样品的分子大小的情况发生时,峰形会恶化。对于分子量在20,000~100,000左右的蛋白质的分离,选择微孔径大、官能团疏水性大小的C4(30nm)柱较为适合。
5)核酸碱基、核苷酸的分离
Hydrosphere C18是适合于亲水性化合物分离的色谱柱,即使在100%水性流动相的条件下也能够使用。对亲水性高的核酸碱基和核苷酸等低分子核酸类的分离有效。
6)寡核苷酸的分离
下图是采用色谱柱Hydrosphere C18对寡核苷酸的分离。由下图可见:适合于亲水性化合物分离的Hydrosphere C18在寡核苷酸分离中,即使在三易基胺浓度很低的分离液条件下也能获得良好的分离。
7)寡核苷酸的分离精炼
下图是采用YMC分析柱Hydrosphere C18(50*4.6mm I.D.)和制备柱YMC-Actus Hydrosphere C18(50*20mm I.D.)分析合成的30 mer寡核(5′-CCGCTCGAGCTAAAAAAAGCCTGTGTTACC-3)。
分析1.0mL /min, 5uL injection;制备提炼 19mL /min, 100uL injection
由上图可见:Hydrosphere C18可以分离链长上仅1残基不同的寡核苷酸,对于目标物和不纯物的分离也非常良好。另外,YMC的制备柱具有与分析柱同等的高效率,可以在不损坏分离的前提下扩大从分析到制备的规模。为此可以在高回收率下进行高效的制备提纯。