YMC反相柱简介
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产品规格

1)用于分子量在5,000以下的化合物分离(微孔径8nm12nm

色谱柱

基材

微孔径(nm

含碳率(%

pH范围

特点及用途

Pro C18

硅胶

12

16

2.0-8.0

l   通用性较高的标准型ODS

l   通过独自的合成方法进行了高度的非活性化处理

l   对于碱性化合物的分离良好

Hydrosphere C18

12

12

l   对于亲水性化合物的分离良好

l   可以用于100%水性流动相

Pro C18 RS

8

22

1.0-10.0

l   的耐酸、耐碱性

l   对于碱性化合物分离良好

l   对于疏水性大的化合物分离十分良好

ODS-A

12

17

2.0-7.5

l   适用于从分析到大量制备的通用型ODS

ODS-AQ

12

14

l   对于亲水性化合物的分离良好

Ph

12

9

l   通过π电子相互作用显示出与ODS相异选择性

Polymer C18

聚合物

-

-

2.0-13.0

l   聚合物类C18

2)用于分子量在5,000~100,000左右的化合物分离(微孔径20nm30nm

色谱柱

基材

微孔径(nm

含碳率(%

pH范围

特点及用途

ODS-A

硅胶

20

12

2.5~7.5

l   微孔径大的ODS

l   用于蛋白质、多肽的分离

30

7

ODS-AQ

20

10

l   低碳ODS

C8

20

7

l   微孔径大的C8

l   对于疏水性相对较高的化合物的分离良好

30

4

C4

20

5

l   微孔径大的C4

l   对于蛋白质的分离良好

30

3

CN

30

3

l   氰基的固有选择性

l   用于疏水性大的蛋白质分离

YMCbasic

20

7

l   对于蛋白质、多肽的分离良好

l   对胰岛素具有的分离能力

Protein-RP

20

4

1.5~7.5

l   用于耐酸性很好的蛋白质、多肽的分离

产品应用

1多肽MW573-3,465的分离

通常用于多肽以外的低分子化合物分离的C1812nm)色谱柱,也同样适合分子量在5,000以下的多肽分离。尤其对于碱性多肽的分离,实施了高度非活性化处理的Pro系列柱十分有效。

如上图所示,其它公司的亲水化合物分离用ODS柱(Brand E2)对碱性多肽(17的色谱峰)显示出拖尾。对此,Hydrosphere C18则显示出良好的分离和的峰形。

2)多肽分析

下图是β-乳球蛋白B的胰蛋白酶消化物的分析例。

1.JPG

由图可见:对于像多肽图析这样的多个多肽的同步微量分析,C1812nm)的半微米型柱十分有效。特别是YMC-Ultra HT Pro C18 12um柱与5um柱相比,由于其分离能力很高,因此检测出的峰数和灵敏度都有所增加。

3)多肽及蛋白质MW4,300-17,000的分离

为考察因微孔径及官能团的不同而造成对分离的影响。下图对于分子量在4,30017,000的多肽及蛋白质,通过微孔径和官能团各不相同的色谱柱进行了分离比较。

因微孔径不同而造成的影响                 因官能团不同而造成的影响

2WIRVA.JPG3.JPG

的微孔径和官能团的组合

4.JPG

由上图可见:填料的微孔径和官能团之中的一项没有达到化时,也会发生峰变宽、化合物之间或不纯物峰间的分离不良等现象。

4)蛋白质MW66,000-96,000的分离

a) 因分离液的不同而造成对分离的影响(C430nm

在分离蛋白质和多肽时,分离液一般采用含有TFA的乙腈和水的梯度洗脱。

5.JPG

从上图可见:使用C430nm柱的高分子蛋白质的分离中,因用于分离液的有机溶剂的不同会表现出对分离模式的影响。如上图中,对于在乙腈和水性流动相里难以分离的样品,由于添加了2-丙醇等不同种类的有机溶剂而使选择性发生了变化,有时会变得可以分离

b) 因微孔径及官能团的不同而造成对分离的影响

6F.JPG

因微孔径不同而造成的影响       因官能团不同而造成的影响

7.JPG

从上图可见:在分离对象化合物分子量在66,00096,000那样的高分子蛋白质分离中,随着微孔径变小峰形会变宽,分离变得不良。

另外,对于填料的官能团,随着C8C18和侧链变长疏水性变大,分离会变得不良。像这种填料的微孔径和官能团不适合样品的分子大小的情况发生时,峰形会恶化。对于分子量在20,000~100,000左右的蛋白质的分离,选择微孔径大、官能团疏水性大小的C430nm柱较为适合。

5)核酸碱基、核苷酸的分离8.JPG

Hydrosphere C18是适合于亲水性化合物分离的色谱柱,即使在100%水性流动相的条件下也能够使用。对亲水性高的核酸碱基和核苷酸等低分子核酸类的分离有效。

6)寡核苷酸的分离

下图是采用色谱柱Hydrosphere C18对寡核苷酸的分离。由下图可见:适合于亲水性化合物分离的Hydrosphere C18在寡核苷酸分离中,即使在三易基胺浓度很低的分离液条件下也能获得良好的分离。77.JPG

7)寡核苷酸的分离精炼

下图是采用YMC分析柱Hydrosphere C1850*4.6mm I.D.)和制备柱YMC-Actus Hydrosphere C1850*20mm I.D.)分析合成的30 mer寡核(5′-CCGCTCGAGCTAAAAAAAGCCTGTGTTACC-3)。

分析1.0mL /min, 5uL injection;制备提炼 19mL /min, 100uL injection

88.JPG

由上图可见:Hydrosphere C18可以分离链长上仅1残基不同的寡核苷酸,对于目标物和不纯物的分离也非常良好。另外,YMC的制备柱具有与分析柱同等的高效率,可以在不损坏分离的前提下扩大从分析到制备的规模。为此可以在高回收率下进行高效的制备提纯。