蛋白质印迹技术原理优质蛋白印迹仪

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　　蛋白质印迹技术原理及进展：

　　蛋白质印迹(Western Blot)，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。由于Western Blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。在信号转导级联反应中，应用Western blotting技术来检测化学修饰(磷酸化与去磷酸化)，蛋白质表达量或者活性状态。

　　与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

　　现在western blot中高灵敏度的化学发光检测、准确定量蛋白、自动化操作和CCD成像系统已经非常普及，目前的发展趋势是多通道荧光检测。Bio-Rad公司已研发出一款集普通成像、化学发光成像、多通道荧光成像和Stain Free免染技术于一体的型成像系统Chemi Doc MP，具有超好的灵敏度、杰出的图像质量、无可匹敌的应用广泛性、系统操作简单快捷等优点。

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