牛口蹄疫O型IgG检测试剂盒厂家
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牛口蹄疫OIgG检测试剂盒

一、产品名称

通用名:牛口蹄疫OIgG测试剂盒(酶联免疫法)

英文名:Test Kit for Bovine Antibody to Foot And Mouth DiseaseVirus (ELISA)

二、包装规格  96T×1/盒、96T×2/

三、预期用途  口蹄疫是由口蹄疫(FMDV)感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、接触性。本试剂盒用于检测牛血清、血浆中口蹄疫O型体,可用于牛口蹄疫O型疫苗免疫效果评价。

四、试剂盒原理

    牛口蹄疫O型IgG检测试剂盒系由预包被口蹄疫O型原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测牛血清、血浆样本中口蹄疫O型体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有口蹄疫O型体,则将与酶标板上原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上原体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加T底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有口蹄疫O型体。

五、试剂盒组成

酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照

六、储存及期

 28℃避光保存,期为12个月。

包被板开封后请于28℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。

七、适用仪器  450nm630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。

牛口蹄疫O型IgG检测试剂盒操作步骤

一、样品准备

1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于28℃保存,长期需置-20℃保存。

2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如5μl血清加入495μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。

3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

二、检验方法

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,28℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl

4.混匀,置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

6.每孔加酶标记物50μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。

7.洗涤,同步骤5

8.每孔依次加底物液A、底物液B50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

结果分析

一、参考值

 实验正常的情况下,阴性对照≤0.15,阳性对照≥0.3

二、牛口蹄疫O型IgG检测试剂盒检验结果的解释  

1.S/N=样品A/阴性对照平均A值(阴性对照平均A值小于0.080.08计算)。

2.S/N2.1时为牛口蹄疫O型体阳性,S/N2.1时为牛口蹄疫O型体阴性。

3.本实验结果为阴性表明体水平不足,建议补打相应疫苗。