本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IL-6单抗包被于酶标板上，实验时标本或标准品中的IL-6会与单抗结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-6抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人IL-6抗体与结合在单抗上的人IL-6结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色，加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值，IL-6浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线求出标本中IL-6的浓度。