色谱柱安装和系统检漏工作完成后，就可以对色谱柱进行老化了。对色谱柱升至一恒定温度，通常为其温度上限。特殊情况下，可加热至高于操作10-20℃左右。但是一定不能超过色谱柱的温度上限，那样极易损坏色谱柱。升温速度一定要快，不要将程序声升温的速度设定的太慢。当得到老化温度后，记录并观察基线。比例放大基线，以便容易观察。初始阶段，基线应持续上升，在到达老化温度后5-10分钟开始下降，并且会持续30-90分钟。当达到一个固定的值后，基线就会稳定下来。如果在2-3小时后基线仍无法稳定在15-20分钟后仍无明显的下降趋势，那么有可能系统装置有泄漏或污染。遇到这样的情况，应立即将柱温降至40℃以下，尽快地检查系统并解决相关问题。如果还是继续地老化，不仅对色谱柱有损害，而且始终得不到正常稳定的基线。另外，老化的时间也不宜过长，不然会降低色谱柱的使用寿命。

一般来说，涂有极性固定相和较厚涂层的色谱柱老化时间较长，而弱极性固定较厚涂层的色谱柱所需的时间较短。而PLOT色谱柱的老化方法又各不相同，具体步骤请参阅随柱子的操作说明书。

如果在色谱柱没有与检测器连接就进行老化，那么老化后，色谱柱末端部分可能已被破坏。要先把柱子末端10-20cm部分截去，再将色谱柱连接到检测器上。

温度限定是指色谱柱能够正常使用的应用温度范围。如果操作温度低于色谱柱的温度下限，那么分离效果和峰形都不会很理想。但这样对色谱柱本身并无什么损害。

温度上限通常有两个数值，数值较低的是恒温极限。在此温度下，色谱柱可以正常使用，而且无具体的持续时间限制。较高的数值是程序升温极限。该温度的持续时间通常不多于十分钟。高于温度上限的操作则会降低色谱柱使用寿命。